杀虫剂选择压力对微小按蚊种群抗药性和行为影响研究

微小按蚊是我国重要的疟疾媒介，拟除虫菊酯杀虫剂浸泡蚊帐和室内滞留喷洒是重要的防治措施，在我国云南一直在应用，已发现微小按蚊对拟除虫菊酯杀虫剂产生了抗药性，初步研究认为我国云南的微小按蚊A和C型吸血行为也有所差异。但是更进一步的行为差异，特别是与杀虫剂选择之间的关系，也就是说微小按蚊对杀虫剂抗药性与吸血和栖息行为的关系，还有待于深入研究。这一科学问题不仅具有环境胁迫压力下种群进化的理论意义，同时具有指导合理使用化学防治阻断疟疾传播的实践意义。本研究以A和C型微小按蚊为对象，研究在长期使用DDT和拟除虫菊酯后，云南疟疾高发区微小按蚊钠通道基因是否存在着与DDT和拟除虫菊酯抗性相关的点突变，以及种群中Kdr基因频率的特征，并研究Kdr基因频率变化与吸血行为和栖息行为的关系，从种群分子遗传学水平，探讨杀虫剂压力下微小按蚊的行为适应性，为选择合理的媒介控制方案预防和阻断疟疾的流行提供理依据。

微小按蚊是我国重要的疟疾传播媒介，室内滞留喷洒和拟除虫菊酯杀虫剂浸泡蚊帐是重要的防治措施，我国云南一直在应用该化学方法防治。具报道已发现微小按蚊对拟除虫菊酯杀虫剂产生了抗药性，有研究认为我国云南的微小按蚊A和C型吸血行为和栖息行为存在差异，但更进一步的行为差异，特别是在杀虫剂压力下微小按蚊对杀虫剂抗药性与吸血和栖息行为的关系，有待深入研究。.1. 微小按蚊分子分型. 微小按蚊复合组成员迄今有微小按蚊A、B、C、D、E，我国云南主要为A、C型，近年也有A/C混合型微小按蚊的报道。先对采集蚊虫进行形态分类，再进行分子分型。An. minimus A 364只，An. minimus C 593只，An. jeyporiensis 19只，An.aconitus 15只，另有2只疑似为微小按蚊A/C混合型。.2. 微小按蚊栖息习性研究. 选取若干牛圈和人房为采样点，采用灯诱法，对各诱蚊灯采集蚊虫进行计数。经过spss统计分析，An. minimus A偏好栖息人房；而An. minimus C偏好栖息于牛圈。.3. 微小按蚊吸血习性研究.根据采样点调查主要动物血源为牛、猪、鸡和人，设计特异性引物进行胃餐鉴定。结果经spss分析，An. minimus A无明显的吸血偏好；而An. minimus C偏好牛血。.4. 微小按蚊钠通道基因序列研究. 根据para型钠离子通道基因序列设计引物扩增An. minimus的ⅡS6区段并测序，共测序微小按蚊736只，其中415只结果理想，比对结果显示在常见kdr突变1014位点无突变，提示该地区微小按蚊的击倒抗性很低或没有产生击倒抗性。.5. 微卫星位点多样性检测结果及分析.根据GenBank查询到An. minimus 28条微卫星序列设计引物，其中八个位点可用于微卫星分析。各个位点期望杂合度与观察杂合度的值非常相似，说明这些标记具有良好的多态性。实验用8个按蚊种群间的生物多样性很好，各个位点的平均多态信息含量处于0.53～0.77之间，云南龙塘村捕获的An.aconitus遗传多样性略低，但都>0.5。哈迪-温伯格平衡检验结果各种群存在多位点的杂合子缺失，偏离了哈迪-温伯格平衡标准，总的群体遗传分化系数Fst=0.1386，各种群之间基因交流较少。