IL-1受体活化激酶在葡萄膜炎发生中的作用及机制

Behcet's disease and Vogt-Koyanagi-Harada syndrome are the two most common uveitis entities leading to blindness in China. Innate immune responses were considered as one of the most important trigger factors for these two diseases and adaptive immune responses mediated by T cells (Type 1 helper T cells (Th1), Th17 and regulatory T cells) are widely accepted as the mechanisms involved in these two diseases. The interleukin-1 receptor-associated kinases (IRAKs) involved in the cellular signaling networks are critical in controlling immune response and inflammation, especially in the differetiation of T cells. Our aims are: 1) to investigate the influence of IRAKs on the differentiation of immune cells, including Th1, Th17, and regulatory T cells in peripheral blood from patients with Behcet's disease and Vogt-Koyanagi-Harada syndrome; 2) to evaluate the roles of IRAKs on the development of uveitis (based on one widely accepted uveitis model, experimental autoimmune uveitis animal models) and on the differentiation of immune cells in the animal, to determine the efficacy of IRAKs treatment in experimental autoimmune uveitis. This project will increase our understanding of the mechanisms of IRAKs involved in autoimmune uveitis and shrow light on IRAKs treatments for autoimmune disease.

Behcet病和Vogt小柳原田综合征是我国常见致盲眼病，天然免疫反应是这两种疾病的主要诱发因素之一，T细胞（Th1、Th17、调节性T细胞）介导的获得性免疫反应是自身免疫性葡萄膜炎发病的主要机制，而IL-1受体活化激酶（IRAKs）在天然免疫反应向获得性免疫反应的传递过程中发挥至关重要的作用。本课题以IRAKs作为研究靶点，①以上述两种葡萄膜炎作为研究对象，探讨调控IRAKs活性对体内T细胞的分化和功能（Th1、Th17、调节性T细胞）是否有影响及其发挥影响的可能机制；②同时以公认的能够代表自身免疫性葡萄膜炎的动物模型- - 实验性自身免疫性葡萄膜炎作为研究对象，进一步探讨调控体内IRAKs活性是否能够减轻炎症的严重程度甚至抑制自身免疫性葡萄膜炎的发生。通过上述实验以期阐明IRAKs在葡萄膜炎发生、发展以及转归中发挥的作用及其机制，为治疗葡萄膜炎和其他自身免疫性疾病提供新的思路。

Behcet病和Vogt小柳原田综合征是我国常见致盲眼病，天然免疫反应是这两种疾病的主要诱发因素之一，T细胞（Th1、Th17）介导的获得性免疫反应是自身免疫性葡萄膜炎发病的主要机制，而IL-1受体活化激酶（IRAKs）在天然免疫反应向获得性免疫反应的传递过程中发挥至关重要的作用。本课题以IRAKs作为研究靶点，以上述两种葡萄膜炎作为研究对象，探讨调控IRAKs活性对体内T细胞的分化和功能（Th1、Th17）是否有影响及其发挥影响的可能机制。通过上述实验以期阐明IRAKs在葡萄膜炎发生、发展以及转归中发挥的作用及其机制，为治疗葡萄膜炎和其他自身免疫性疾病提供新的思路。收集39名VKH综合征病人，28名Behcet病人及64名正常人纳入本次研究。检测活动期及静止期VKH综合征病人、Behcet病人及正常人外周血中IRAK1及IRAK4的水平。从VKH综合征活动期病人、Behcet病活动期病人及正常人外周血中分离CD4+T细胞，加入IL-Iβ或者IL-18共培养，加入或者不加入IRAK1/4抑制剂，采用改良的MTT的方法检测CD4+T细胞的增殖情况。采用ELISA的方法检测IL-17及IFN-γ的水平。采用流式细胞术的方法检测CD4+IL-17+T 细胞及 CD4+IFN-γ+T 细胞的频率。在正常人中，采用流式细胞术的方法检测IRAK1/4抑制剂对NF-κB、STAT1及STAT3活性的影响。结果如下：在VKH综合征活动期病人中，IRAK1及IRAK4的表达水平明显高于静止期病人及正常人，在Behcet病人中也得到了相似的结果。在活动期VKH综合征病人、Behcet病人及正常人中，与IRAK1/4抑制剂共培养后CD4+T细胞的增殖明显被抑制，同时IL-17及IFN-γ的分泌也明显被抑制。当与IRAK1/4抑制剂共培养后，CD4+IL-17+T 细胞及CD4+IFN-γ+T细胞的频率明显降低。在正常人中，我们观察到CD4+ T细胞与IRAK1/4抑制剂共培养后， NF-κB, STAT1, and STAT3的磷酸化水平明显降低。通过上述实验，我们认为IRAK1及IRAK4在VKH综合征及Behcet病活动期病人中的高表达与疾病活性密切相关。IRAK1及IRAK4在VKH综合征及Behcet病人中的高表达可能参与了这两种致盲性眼部疾病的发病机制。