H3与H9亚型流感病毒跨越种间屏障传播的分子机制研究

开展流感病毒跨越种间屏障传播的分子机制(尤其是病毒与宿主细胞相互作用的分子机理)研究，不仅有助于深入认识流感的病原学、感染机制、流行病学、公共卫生学等内容，而且对于流感的监测、疫苗和抗病毒药物的研制都将具有重要的现实意义。本项目以阐明流感病毒感染宿主及跨越种间屏障传播的分子机制为出发点，同时从病毒和宿主细胞受体两方面着手。首先用固相酶联方法鉴定不同种属来源的H3N2和H9N2亚型流感病毒的受体结合特性，即病毒与SAα2,3Gal和SAα2,6Gal的结合能力；在此基础上用固相质膜结合方法鉴定已知受体结合类型的病毒与人、猪、鸡气管/支气管上皮细胞的结合能力；以及基因重排在病毒感染宿主和跨越种间屏障传播中的作用。以期揭示H3N2和H9N2亚型流感病毒感染宿主、组织嗜性以及跨越种间屏障传播的分子机制，也为今后研究受体的化学组成和空间构象及抗流感病毒药物奠定基础。

本项目以阐明流感病毒感染宿主及跨越种间屏障传播的分子机制为出发点，同时从病毒和宿主细胞受体两方面着手。利用固相酶联方法鉴定猪H3N2和鸡H9N2亚型流感病毒的受体结合特性，即病毒与禽型和人型受体的结合能力；在此基础上分别利用糖矩阵法和固相质膜结合方法与已知受体亲和性的病毒鉴定猪气管和鸡胚成纤维上皮细胞的受体类型；以及基因重排在病毒感染宿主和致病力中的作用。研究结果表明，在吉林猪群中同时存在近代人源H3N2亚型病毒及其与禽源H5亚型病毒的重排株；对于含有H5亚型病毒M和NS基因的重排株，其复制能力和致病力显著增强；在吉林规模化养鸡场中分离到了具有新抗原性的H9N2毒株，这些毒株构成了Y280-like亚系中的一个新分支，它们为近来感染我国人群的禽H7N9病毒提供了内部基因。无论是猪H3N2病毒分离株，还是鸡H9N2病毒分离株，均具有与禽源和人源受体结合的能力，且偏嗜人型受体。在猪气管上皮细胞和鸡胚成纤维细胞膜上同时具有流感病毒的禽型和人型受体。对H3N2病毒而言，HA226和228位是决定病毒受体亲和性的重要位点；而HA226L虽然在H9N2病毒与受体结合过程中起作用，但并非决定作用。本项目的研究结果揭示了H3N2和H9N2亚型流感病毒感染宿主与跨越种间屏障传播的分子机制，为今后研究受体的化学组成和空间构象及抗流感病毒药物奠定基础。