乙型肝炎病毒表面抗原转录后调节因子cDNA克隆

用RNA蛋白质印迹试验筛选HBV转录后调节因子cDNA克隆，对国外的方法进行了三方面的改良，提高了筛选效率，（1）改双压片法为单压片法（2）用MMK缓冲液使RNA探针恢复二级结构，（3）用过柱法代替过胶法经纯化RNA探针，减少探针的损失，筛选人肝cDNA文库约25万个克隆，第一筛获得可凝阳性克隆18个，第二筛发现第7号克隆产生强阳性反应，第7号克隆经第三筛达到100%阳性，对该克隆的cDNA进行序列分析并和GenGanK的资料进行比较，发现这一克隆与人的核因子90具有高度同源性，共mRNA的表达水平以心脏，骨髓肌，肾脏，肝脏的含量丰富，将该克隆的cDNA在大肠杆菌中表达，已获得具有RNA结合活性的融合蛋白，我们的工作已超过预期目标并进入“973”项目的子课题。