重组生物粘合剂蛋白质的研制

具有高粘附性能的生物粘合剂在生物及医学的诸多领域具有广泛的需求和意义，同时又是一个研究者较少、多学科交叉的新生长点。来源于贝类的贻贝粘合蛋白MAPs具有如下快速固化、较好的柔韧和粘附性、底物结合普遍性广、较好的抗环境干扰性等粘附特点；胶原蛋白是哺乳动物体内含量最多、伸展和粘附等性能好的蛋白质。本课题拟用蛋白质工程技术构建并兼俱MAPs和人胶原蛋白双重特点的、粘附性能更加优良的新型生物粘合剂，探索该新型生物粘合剂可溶性表达，实现该新型生物粘合剂蛋白在大肠杆菌的稳定、高效表达及其分离纯化工艺，价格低廉地制备大量该新型生物粘合剂蛋白，进行理化性能、生物学性能测试研究，为研制具有自主知识产权的新型生物粘合剂蛋白及其潜在的应用奠定基础。

本课题采用蛋白质工程技术构建了一个由贻贝粘合蛋白和胶原蛋白粘附核心肽段组成的融合粘附蛋白P15，优化了P15蛋白质的表达条件，实现了P15蛋白在大肠杆菌的可溶性高效表达及其分离纯化工艺。我们详细地分析了P15对多种材料和多种细胞的粘附性能，P15对多种细胞生长和迁移的影响，并利用原子力显微镜进行了原子力分析。结果显示：与对照蛋白质相比，P15蛋白质具有更强的粘附能力、具有促进细胞生长的能力，具有更强的原子结合力，因此具有良好的应用前景。