SREBP-1c在膳食脂肪酸对非酒精性脂肪肝影响中的作用

非酒精性脂肪肝（NAFLD）已经成为全球的主要公共卫生问题之一。大约15-30%的成年人有NAFLD，而目前尚未发现治疗NAFLD的特效药物。膳食中n-3 多不饱和脂肪酸（n-3 PUFA）摄入量与NAFLD发病率负相关，但是其分子机制仍不清楚。固醇调节元件结合蛋白（SREBPs）是调控与脂质代谢相关基因表达的关键性转录因子，其功能异常对NAFLD有显著影响。本项目选用NAFLD患者、大鼠NAFLD动物模型、HepG2细胞株为研究对象，采用病例-对照研究、SREBP-1c基因多态性、shRNA技术、RT-PCR、免疫印迹分析、EMSA等手段和方法，研究SREBP-1c在n-3 PUFA预防NAFLD发生发展中的作用及其分子机制。该项目的突出意义在于：围绕SREBP-1c这一条主干线，从不同层面阐明膳食脂肪酸对NAFLD的影响及其分子机制，为NAFLD的预防和治疗提供理论依据。

按计划从人群的病例对照研究、动物实验和体外细胞实验三个层面完成了SREBP-1c在膳食脂肪酸影响非酒精性脂肪肝发生发展中的作用研究。在重庆西南医院征集了非酒精性脂肪肝病例300例，对照300例，完成了膳食调查，以及血糖、血脂、肝功等指标检测，并收集了血液样品进行了脂肪酸分析和SREBP-1c基因多态性分析；完成了膳食脂肪酸对大鼠NAFLD的形成和SREBP-1c基因表达的影响研究；完成了脂肪酸对SREBP-1c不同功能状态的肝细胞脂肪蓄积的影响及有关分子机制研究。主要发现：（1）肥胖是NAFLD的独立危险因素；（2）日常膳食中过量摄入能量、动物性食物（尤其是猪肉、牛肉等红肉类）、油脂等是重庆地区NAFLD的膳食危险因素；（3）SREBP-1c基因18号外显子54G/C多态性分析表明C等位基因携带者患NAFLD的风险是G等位基因的1.428倍(OR=1.428,95% CI:1.036～2.143)；（4）运用logistic回归模型及叉生分析发现SREBP-1c基因型与总能量、总脂肪摄入量、动物来源脂肪摄入量之间存在正相加模型交互作用，而与红细胞膜总MUFA水平之间存在负相加模型交互作用；（5）含猪油或橄榄油的高脂膳食通过上调SREBP-1c的表达促进大鼠NAFLD的发生发展；(6) 随着SREBP-1c表达增加，HepG2细胞内TG含量及脂类总量也增加，HepG2细胞脂肪变性加重。（7）油酸（OA）、棕榈酸（PA）上调HepG2细胞SREBP-1c的表达，使细胞脂肪蓄积增多，而二十碳五烯酸（EPA）与亚油酸（LA）通过下调SREBP-1c的表达，减少细胞甘油三酯合成。总之，高能量、高脂肪摄入导致超重与肥胖是NAFLD的主要危险因素，SREBP-1c可能在膳食脂肪酸对NAFLD的影响中起了重要作用，不同性质的脂肪酸可能通过调节SREBP-1c的表达与转录活性而影响NAFLD的发生发展，在体外细胞培养、大鼠动物实验均发现MUFA促进NAFLD的发生发展，而人群病例对照研究发现红细胞膜MUFA含量与NAFLD的发生负相关。此外，由于重庆居民膳食中n-3 PUFA的摄入量不多，未观察到n-3 PUFA对重庆居民NAFLD发生发展的保护作用。