基于GPIIb/IIIa遗传多态性的抗血栓药物个体化治疗研究

Large interindividual pharmacodynamics (PD) variability for antithrombotic treatment is commonly observed, and the role of genetic polymorphisms of the GP IIb/IIIa receptor has been investigated. But the results of these studies are inconsistent. The present program aimed to examine the effects of single-nucleotide polymorphisms (SNPs) in GPIIb and GPIIIa gene base on the results of our previous work in clinical trails and DNA sequencing. Second, build a stable transgenic cell line expressing GPIIb and GPIIIa wild-type and mutant alleles, investigate the effect of each mutant allele on receptor expression, affinity and efficacy. Third, we intended to assess the impact of these SNPs on clopidogrel and abciximab pharmacodynamics in patient with acute coronary syndrome. The ultimate goal is to investigate the SNPs function, and to clarify the role of these genotypes in interindividual PD variability for antithrombotic treatment.

血小板膜糖蛋白受体GPIIb/IIIa在血栓性疾病的发生发展及药物治疗中起重要作用，但目前对其遗传变异及其在药物反应差异中的作用尚存争议。本项目以前期工作已获得的GPIIb/IIIa基因单核苷酸多态性（SNP）和基因型/药效相关性研究结果为基础，首先在群体水平分析健康人和冠心病患者GPIIb、GPIIIa SNPs分布特征；然后构建稳定表达GPIIb、GIIIa野生型和突变等位基因的转基因细胞系，在细胞水平研究各突变等位基因对受体的表达、亲和力和效能等生物学功能的影响；最后在此基础上选取不同基因型的急性冠脉综合征和行PCI术患者，分别采用氯吡格雷和阿昔单抗进行常规临床抗血小板治疗，观察临床疗效、不良反应等，验证基因型与药效关系。本课题旨在从群体、细胞到分子水平阐明GPIIb、GPIIIa多态性在药物反应个体差异及疾病发生中的作用。

血小板膜糖蛋白受体GPIIb/IIIa在血栓性疾病的发生发展及药物治疗中起重要作用，但目前对其遗传变异及其在药物反应差异中的作用尚存争议。为了阐明中国人的GPIIb/IIIa SNP分布特点及SNP的功能，本项目首先扩大样本量，检测健康人群中SNP的分布情况，并检测血小板功能指标，包括凝血指标（PT、APTT、TT、FIB）、血小板计数、平均血小板体积、静息血小板表面平均GPIIb/IIIa受体数，分析SNP与血小板功能指标间的相关性，本项目发现：1、与文献报道中的其他人种相比，中国人GPIIb、GPIIIa SNP的分布频率和SNP间的连锁不平衡关系与其他人种都存在较大差异；2、本项目发现了12个与凝血指标相关的SNP，有待后续研究深入发现其与疾病和药物治疗的关系。然后本项目进一步扩大样本量分析健康人（150例）和冠心病患者（260例）GPIIb、GPIIIa SNPs分布特征,发现有8个SNP在两组人群中存在分布差异（P<0.05）。第一部分和第二部分研究中有4个SNP（rs1009312,rs2015049.rs70940817, rs56197296）与疾病易感性和血小板功能都相关，这4个SNP将是后续药效、疾病相关研究,以及细胞水平研究的重点SNP。在上述两个研究的基础上，根据项目计划书本项目在临床招募PCI术后长期口服抗血小板药物阿司匹林或氯吡格雷的患者，检测血小板聚集率，并长期随访观察心血管事件、出血事件的发生，目前此部分已入组患者95例，随访正在进行中，已完成50患者的SNP测定，数据正在分析中。最后，本项目在细胞水平研究GPIIb、GIIIa野生型和突变等位基因对血小板功能的影响，采用了点突变小鼠模型，研究rs70940817对小鼠凝血和药效的影响；同时本项目还计划应用Knock-out小鼠模型研究GPIIb-IIIa受体与新发现的血小板膜蛋白的协同作用的细胞学机理。本项目已完成基因水平、健康人水平的研究，患者水平的研究已完成，数据正在整理中，细胞、动物水平的研究正在进行。将实现从基因、细胞、动物到人体（健康和疾病状态）水平的对GPIIb/IIIa受体的全面研究。