新型佐剂对呼吸道合胞病毒亚单位疫苗增强的肺部免疫病理的免疫调节作用及机制研究

呼吸道合胞病毒（RSV）是婴幼儿下呼吸道感染的最重要病原,接种疫苗者自然感染RSV后往往导致加重的Th2型优势应答和肺部炎症性病理损伤，这是RSV疫苗成功的主要障碍。前期工作将RSV黏附蛋白的中和表位片段与基质蛋白的CTL表位融合表达得候选疫苗G1F/M2，免疫小鼠诱导了长期的中和抗体、CTL及Th1/Th2混合应答，但未完全解决肺部免疫病理问题。本项目拟将已初筛的免疫调节型佐剂：CpGs10、HSP70L1、单磷酰酯A、IL-23及IL-27等分别或联合与疫苗共免疫，从佐剂对适应性免疫应答类型和记忆性CD8+T、Th1/Th2细胞的产生和功能的影响、及对RSV攻击后的固有免疫成分巨噬细胞、嗜酸性粒细胞、中性粒细胞、炎症因子和趋化因子在肺部浸润的影响等角度，研究其对疫苗增强的肺部免疫病理的调节作用及调节机制，为发展安全有效的RSV疫苗奠定理论基础；为伴有炎症病理损伤的病毒疫苗研究提供新思路

防止疫苗增强的免疫病理是解决呼吸道合胞病毒（RSV）疫苗安全性问题的关键所在。本课题研究了多种新型佐剂对重组疫苗相关的免疫病理的调节作用和调节机制，其中CpG和IL-27能有效抑制免疫病理，它们通过调节疫苗诱导的免疫记忆而抑制病毒激发的免疫病理。.Th2优势应答是免疫病理的主要因素。CpG是Th1型佐剂，腹腔注射G1F/M2+CpG诱导了大量Th1效应记忆及CD4+/CD8+中央记忆细胞，RSV攻击后激活了显著的Th1免疫应答，Th2应答被抑制，且肺部仅有少量炎症性细胞因子、趋化因子和轻微的炎症病理。而鼻腔注射诱导了很少记忆细胞，RSV攻击后激活了较弱的Th1和Th2应答，肺部有强烈炎症病理；提示缺乏Th1应答，而不是Th2优势应答，可能是导致免疫病理的关键因素。.IL-23和IL-27是IL-12家族新成员。G1F/M2+pcDNA3-IL-27不影响中央记忆和Th1效应记忆细胞，但显著抑制了Th2效应记忆细胞，RSV攻击后未见免疫病理，这与其诱导的适度Th1、弱Th2和Th17记忆应答一致；而G1F/M2+pcDNA3-IL-23诱导了大量记忆细胞，RSV攻击后激活了强烈的Th1、Th2和Th17记忆应答，肺部可见严重炎症病理；表明Th2和Th17强应答可能是产生炎症病理的重要因素；另外，IL-27可能通过抑制过强的Th2和Th17免疫记忆来抑制免疫病理。.MPLA是TLR4配体， G1F/M2+MPLA免疫小鼠诱导了显著的Th1效应记忆细胞，而Th2效应记忆细胞被抑制，RSV攻击后除了激活Th1强应答外还产生了大量IL-17，肺组织中炎症性细胞因子表达明显降低，但仍有明显的炎症细胞浸润；表明IL-17--Th17型细胞因子，可能参与了肺部炎症浸润。.总之，本项目筛选了能抑制疫苗增强的免疫病理的佐剂—CpG 和IL-27，初步探讨了新型佐剂对免疫病理的调节机制，即通过调节疫苗诱导的细胞免疫记忆而调节RSV攻击后激活的固有免疫和适应性细胞免疫应答，从而对免疫病理进行调节；另外，我们发现：除了传统认为的Th2优势应答是导致免疫病理的重要因素外， Th1应答缺乏和Th17应答优势也是疫苗增强的免疫病理的重要发病机制。本研究成果为研制安全有效的RSV疫苗和佐剂提供了理论依据。