新型慢性乙型肝炎病毒感染性别差异动物模型构建及机制研究

Hepatitis B virus (HBV) is an important pathogen that chronically infects more men than women. Due to the lack of an appropriate animal model, the precise mechanisms that account for this gender disparity remain unclear. We previously employed a nontransgenic model of persistent HBV infection in immunocompetent mice created by hydrodynamic injection of pAAV/HBV1.2 into C57BL/6 mouse. Preliminary study has shown that gender also affects the ability to clear HBV in B6 mice. In this project, we will establish a new animal model for gender disparity in chronic HBV infection generated by hydrodynamically injecting pAAV/HBV1.2 into male and female C57BL/6 mouse. Sex differences in immune response to HBV will be deeply analyzed and differential protein expression in hepatocyte of male and female C57BL/6 mouse will be examined using iTRAQ proteomics approach. We hope to uncover the immune and molecular mechanisms of why men are more likely than women to develop chronic HBV infection.

慢性乙型肝炎病毒感染的一个显著特点是男性多于女性。由于缺乏合适的研究模型，乙肝慢性感染的性别差异现象目前还没有明确的解释机制。我们之前利用pAAV/HBV1.2质粒高压注射C57BL/6鼠建立非转基因HBV慢性携带动物模型来模拟人类慢性感染HBV状态；初步研究结果显示，与人类感染HBV相似，性别也影响C57BL/6鼠携带pAAV/HBV1.2质粒状态。本项目拟采用pAAV/HBV1.2质粒分别注射雄性和雌性C57BL/6鼠构建乙肝慢性感染性别差异动物模型，深入细致地分析雄性和雌性C57BL/6鼠对HBV不同应答的免疫学特征；并且通过iTRAQ蛋白质组学技术手段比较HBV背景下雌、雄小鼠肝实质细胞蛋白质表达的差异，以期揭示男性HBV感染易于慢性化的免疫学和分子机制。

慢性乙型肝炎病毒感染的一个显著特点是男性多于女性,男性HBV患者通常病毒滴度较女性高，并且，男性罹患慢性HBV肝炎后比女性更容易发展成肝硬化和肝癌。由于缺乏合适的研究模型，乙肝慢性感染的性别差异现象目前还没有明确的解释机制。HBV感染的清除依赖于宿主的免疫系统，关于免疫系统在慢性HBV感染性别差异中所扮演的作用文章报道较少。本项目中，我们采用pAAV/HBV1.2质粒分别注射雄性和雌性C57BL/6鼠构建乙肝慢性感染性别差异动物模型，研究结果显示，与人类感染HBV相似，性别也影响C57BL/6鼠携带pAAV/HBV1.2质粒状态。我们还研究了HBV感染对机体天然免疫系统NK细胞的影响。结果显示pAAV/HBV1.2质粒高压注射并不会激活NK细胞，提示HBV感染可逃逸NK细胞免疫监视。采用PolyI:C活化天然免疫系统可显著抑制HBV复制表达，PolyI:C注射可诱导NK细胞活化并且向肝脏迁移，anti-ASGM1抗体清除NK细胞可逆转PolyI:C抑制HBV效应。进一步研究发现，活化的NK细胞主要通过分泌IFN-γ来抑制HBV复制。以上研究表明活化NK细胞可能是治疗HBV感染的一种新途径。