调控PPAR表达差异介导的神经信号系统治疗周围神经损伤后疼痛

The therapy of neuropathic pain induced by peripheral nerve injury is urgently to be solved in clinic. Therefore to illuminate the mechanism of neuropathic pain and to find out the effective treatment is significantly important. Studies confirmed that the inflammation and immunization of central nervous system is critical to the onset of neuropathic pain. In this study, the gene expression of PPAR will be regulated and we will research the role of PPAR in regulating the nervous inflammation and neuropathic pain. The third generation recombiantion lentivirus vector containing the tetracycline operon system and Cre-loxP recombination system will be constructed to change the expression of PPAR. The controllability and security of regulated PPAR expression and its effects on the expression of inflammation medium and pain will be proved in vitro and in pain model of rats. Biochip will be used to research the pain signal system in spinal dorsal horn.. In the study,the neuropathic pain will be cured by gene regulation. New theory of the neuropathic pain mechanism about the central sensibilization will be raised and the new targets will be provide for clinic medicine to release pain.

周围神经损伤导致的病理性疼痛的治疗是临床亟待解决的课题，因此阐明其发病机制和寻找有效治疗方法具有重要的临床意义。研究证实中枢神经系统的炎症免疫在疼痛发生中有重要作用，本研究通过可控性调节免疫炎症的关键因子PPARr基因表达，研究其对中枢神经免疫炎症和神经损伤性病理疼痛的调节作用。通过构建包含四环素操纵子系统和Cre-loxP重组系统的PPARr基因第三代重组慢病毒载体改变PPARr表达，在体外细胞和大鼠疼痛模型水平阐明靶向于PPARr基因的慢病毒载体过表达PPARr基因的可调控性,以及对细胞炎性介质表达和疼痛的可调性和安全性，并利用生物芯片技术研究脊髓背角疼痛信号系统。. 本研究从基因调节水平治疗周围神经损伤后疼痛，本研究的完成将为神经损伤及修复的中枢疼痛敏化机制提供新的理论依据，为临床神经损伤后疼痛治疗药物提供新的靶点。

周围神经损伤导致的病理性疼痛因机制未明，而缺乏有效的治疗方法。已证实小胶质细胞活化导致的中枢神经系统的炎症免疫在病理性疼痛发生中有重要作用，免疫炎症的关键因子PPARγ对小胶质细胞功能和神经病理性疼痛产生的调控机制尚不清。本项目旨在研究PPARγ在中枢神经免疫炎症和神经病理性疼痛发生机制中的作用，通过构建PPARγ基因重组慢病毒载体，研究PPARγ表达对BV-2小胶质细胞炎性活化和慢性挤压伤CCI疼痛模型大鼠的痛阈和脊髓背角小胶质细胞功能和疼痛信号系统的调控机制。细胞实验证实了BV-2小胶质细胞PPARγ过表达可以调节小胶质细胞免疫活性和极性，明显抑制促炎症介质和免疫分子的表达和细胞内p-p38MAPK, ERK等炎症通路，使其向M2优势方向活化。在大鼠CCI模型，鞘内注射PPARγ基因重组慢病毒有镇痛效应。PPARγ过表达通过抑制脊髓背角P-P38MAPK、P-ERK，NFkappaB等通路的活化减少小胶质细胞趋化因子受体CX3CR1和炎症因子表达而抑制小胶质细胞M1活化。另外，疼痛大鼠实验证实了PPARγ表达上调可以通过增加内源性阿片释放，抑制脊髓疼痛信号通路和病理性疼痛的产生。本项目结果证实了PPARγ在病理性疼痛机制中的重要作用，为神经病理性疼痛的产生机理提供了新的理论依据，PPARγ过表达可能成为临床疼痛治疗新的方法。