Treg细胞调控HCV特异性CD8+记忆T细胞的活化增殖参与HCV慢性化机制

Persistent viral infection was crucial in HCV chronic infection.The evidence showed that HCV-specific CD8+ memory T cells were relative to HCV chronic infection. CD4+CD25+FOXP3+ regulatory Tcell(Treg) can regulate the function of HCV-specific CD8+ memory T cells. The mechanism of Treg cells regulating the activation, production of HCV-specific memory T cells in HCV chronic infection need to be interpreted. In this study,the relationship between Treg and HCV-specific CD8+ memory T cells will be investigated in spontaneously HCV-recovered and persistently HCV-infected individuals and healthy donators in vitro. The role of Treg regulating the function of HCV-specific CD8+ memory T cells through cell-cell contact and cytokines secreted by Treg will be investigated by Treg and HCV-specific CD8+ memory T cells co-culture directly and indirectly. In vivo,the further study by the mouse that accept HCV-specific CD8+ memory T cells will demonstrate the mechanism of Treg cells regulating fuction of HCV-specific memory T cells in HCV chronic infection through adoptive transfer Treg and cytokines secreted.These experiments might develop novel immunotherapy to combat this global epidemic viral infection

持续病毒感染是导致丙型肝炎慢性化的关键，近年研究发现丙型肝炎病毒（Hepatitis C virus，HCV）特异性CD8+记忆T细胞与HCV感染慢性化有关；动物实验证实CD4+CD25+FOXP3+调节性T细胞（regulatory T cell，Treg）可以通过调控HCV特异性CD8+记忆性T细胞的产生、活化、增殖、杀伤等参与HCV感染慢性化，但其具体机制有待进一步阐明。本课题拟选取HCV急性感染自愈者、慢性HCV感染者和健康对照者作为研究对象，通过直接、间接混合培养来研究人Treg细胞对HCV特异性CD8+记忆性T细胞的调控在HCV感染慢性化中的作用及其机制；通过HCV转基因鼠模型过继转移Treg及Treg分泌的细胞因子进一步证实Treg通过对HCV特异性CD8+记忆T细胞的调控参与HCV感染慢性化的机制。研究结果将为阐明HCV感染后慢性化机制提供实验依据和理论基础。

持续病毒感染是导致丙型肝炎慢性化的关键，也是感染病学和病毒免疫学研究的热点，近年来的研究发现Treg在HCV持续感染中发挥重要的作用，而特异性记忆CD8+ T细胞应答是控制再次感染和病毒感染后清除的关键，对非人灵长类动物研究表明HCV慢性感染的动物体内Treg可能通过调节HCV特异性T细胞向记忆T细胞的转化或者调节HCV特异性CD8+记忆T细胞的活化参与HCV持续感染，但其具体机制有待进一步阐明。.本课题选取HCV急性感染自愈者、慢性HCV感染者和健康对照者作为研究对象，以Treg为切入点围绕Treg对HCV特异性CD8+记忆T细胞的调控机制进行深入的研究。主要完成了以下几方面的工作：1.完成109例慢性丙肝患者、20例急性感染自愈者和 20 例健康对照的招募、筛选及临床资料的整理；2.完成33例慢性丙肝患者的Treg细胞和HCV 特异性 CD8+记忆 T 细胞分离和活化增殖等检测；3.明确持续HCV感染者和急性感染自愈者中CD4+CD25+Treg 细胞抑制IFN-γ的产生、扩增、活化及引起HCV-特异性T细胞死亡；4.发现Treg细胞在HCV持续感染和急性感染自愈者中都能控制HCV-特异性T细胞； 5.发现三组研究对象的TNF-α、TGF-β、IL-2 和IL-10细胞因子水平存在明显差异，揭示Treg细胞对HCV特异性CD8+记忆 T 细胞功能的影响；6.通过Treg细胞对HCV特异性CD8+记忆 T 细胞共培养研究，观察Treg细胞对其分化和增殖的调节作用，在此基础上推测Treg与HCV特异性CD8+记忆 T 细胞之间的调控机制。调控机制的全面阐明将会为研究HCV感染慢性化机制提供理论基础；另一方面即便是在绝大多数丙肝患者已得到临床治愈的当下也可以为其它感染性疾病的慢性化机制研究提供参考。