促使胎盘源间充质干细胞在辐射后NOD/SCID小鼠中归巢的实验研究

取液氮中冷冻保存的胎盘源间充质干细胞复温，然后用细胞因子孵育24 小时，提高胎盘源间充质干细胞表面粘附分子和趋化因子受体的表达，用流式细胞术、Transwell 迁移实验和支持脐血CD34+细胞扩增实验，检测间充质干细胞的生物学特性及其对造血干细胞增值的影响。把孵育后不同剂量的胎盘源间充质干细胞输入经全身照射的NOD/SCID 小鼠体内。分别在1 天和2 个月后，用荧光定量PCR 检测实验组、对照组和空白对照组小鼠多器官上胎盘源间充质干细胞的数量和比例。探讨冷冻保存复温后胎盘源间充质干细胞表面表达的粘附分子和趋化因子受体表达量以及细胞输入量对其归巢的影响，为冷冻保存复温后胎盘源间充质干细胞的临床应用新方案提供相关信息，指导临床级间充质干细胞库的建设和应用

间充质干细胞的临床试验已经在多个疾病治疗中开展，提高其归巢能力能促使临床应用。本课题在完善临床级胎盘源间充质干细胞分离、扩增的基础上，用混合细胞因子（细胞因子Flt-3配体、SCF、IL-6、IL-3和TNF-α，终浓度分别为300ng/ml、50 ng/ml、50 ng/ml、10 ng/ml、10 ng/ml）孵育24小时，VCAM-1、ICAM-l、VLA-4和CXCR4的表达量分别为21.0±0.89%、62.4±0.28%、67.5±2.11%、44.3±0.95%。1 X10^5个和1X10^6个正常培养或孵育后的hpMSCs经尾静脉输注入辐照后Balb/c小鼠体内，用流式细胞术、实时荧光定量PCR和数字PCR检测分析表明，在移植的第28天，hpMSCs 在脑、心、肝、脾、肺、胃、肾、肠、大腿肌肉、皮肤、血液和骨髓中均出现人源细胞，1X10^6个细胞输注量比1 X10^5个细胞输注量有利于细胞的归巢，混合细胞因子孵育后的hpMSCs比未孵育的hpMSCs的归巢能力提高，在胃、大腿肌肉和骨髓中的归巢能力分别提高2.5倍、3倍和2倍，而且孵育后1X10^6个细胞输注量和1 X10^5个细胞输注量的归巢能力提高倍数和主要归巢部位相一致。为冷冻保存复温后胎盘源间充质干细胞的临床应用新方案提供相关信息，指导临床级间充质干细胞库的建设和应用。