c-Myc诱导的长链非编码RNA MNX1-AS1调控非小细胞肺癌恶性增殖的机制研究

Numerous studies have demonstrated that long non-coding RNA (lncRNA) could affect the malignant proliferation of non-small cell long cancer (NSCLC) cells. Our preliminary work has shown that the expression level of MNX1-AS1 was obviously higher in NSCLC tissues. Further, functional assays proved that MNX1-AS1 could affect the proliferation of NSCLC cells. In addition, c-Myc overexpression promoted the transcription of MNX1-AS1. RNA pull-down and RIP assays proved that MNX1-AS1 could bind with IGF2BP1. Furthermore, the expression of MNX1-AS1 had positive impacts on the mRNA level of c-Myc. Therefore, we propose our hypothesis that c-Myc could induce the expression of MNX1-AS1 and MNX1-AS1 could bind with IGF2BP1, thereby increasing the stability of the mRNA of c-Myc, thus promoting NSCLC proliferation by regulating other genes. We will expand the number of clinical samples and confirm the hypothesis with related technology in vitro and in vivo.This study will clarify the crucial role of MNX1-AS1 in NSCLC proliferation and provide novel strategies for the diagnosis and treatment of NSCLC.

研究表明长链非编码RNA（lncRNA）与非小细胞肺癌（NSCLC）的恶性增殖密切相关。课题组前期研究发现lncRNA MNX1-AS1在NSCLC中显著上调，功能实验表明MNX1-AS1可明显影响NSCLC的增殖；同时，MNX1-AS1的高表达受到c-Myc的诱导；RNA pull-down及RIP实验证实MNX1-AS1可与IGF2BP1特异性结合，且MNX1-AS1的表达水平可正向影响c-Myc mRNA的表达。据此提出假设：c-Myc转录激活MNX1-AS1，MNX1-AS1通过绑定IGF2BP1维持c-Myc mRNA稳定性，形成正反馈调节通路，同时可能调节其他潜在靶基因的表达，从而促进NSCLC的恶性增殖。本课题将从临床组织、细胞水平、动物水平运用相关实验技术证实上述假设，阐明MNX1-AS1调控NSCLC恶性增殖的分子机制，为NSCLC的诊疗提供新思路。

肺癌是对人类健康威胁最大的恶性肿瘤之一，也已经成为我国发病率及死亡率最高的恶性肿瘤之一；其中非小细胞肺癌（NSCLC）约占肺癌的80%左右。研究表明长链非编码RNA（lncRNA）与NSCLC的恶性增殖密切相关，但其具体相关分子机制尚不清楚。本课题探究了lncRNA MNX1-AS1在NSCLC中的表达、功能及相关分子机制。首先，本研究通过分析GEO 及TCGA数据发现MNX1-AS1在NSCLC中表达显著上调，高表达MNX1-AS1的NSCLC患者的总生存期（OS）及无进展生存期(PFS)明显缩短。进而本课题组基于RACE实验证实MNX1-AS1全长，构建其干扰RNA和过表达质粒。体内外实验（MTT、克隆形成、EdU实验、Transwell实验及裸鼠皮下瘤实验）表明MNX1-AS1可明显影响NSCLC的增殖能力。同时，生物信息学分析联合ChiP及荧光素酶报告基因实验证明MNX1-AS1的高表达受转录因子c-Myc的诱导；RNA pull-down及RIP实验证实MNX1-AS1可与蛋白IGF2BP1特异性结合；转录组测序发现MNX1-AS1可影响c-Myc的表达，并通过RIP及放线菌素D实验表明IGF2BP1在转录后调控c-Myc mRNA的稳定性。据此本研究发现c-Myc转录激活MNX1-AS1表达，MNX1-AS1通过绑定IGF2BP1维持c-Myc mRNA稳定性，形成正反馈调节通路，从而促进NSCLC的恶性增殖；阐明了MNX1-AS1调控NSCLC恶性增殖的分子机制，为NSCLC的诊疗提供新思路。