干扰P40减轻慢性心脏移植物血管病及机制的实验研究

寻找有效治疗靶点，更好的干预慢性排斥反应一直是移植免疫学的难点。P40是一种重要的激活性细胞因子，在激活固有免疫和获得性免疫过程中都发挥着重要作用。本课题组前期证实阻断p40可以明显减轻小鼠心脏移植急性排斥反应的程度，移植物内效应性Th1、Th17、炎症细胞的比例均明显降低。慢性排斥与急性排斥的机制有异同，干预p40能否对慢性移植物血管病起到保护作用及可能机制值得进一步探讨。本项目拟通过建立小鼠心脏移植慢性排斥模型，研究阻断p40对慢性移植物血管病的保护作用，并采用免疫学、分子生物学、细胞学等，通过对Mφ功能亚群（M1/M2）、T细胞功能亚群（Th17/Treg、Th1/Th2）、DC、中性粒细胞、血管内皮、平滑肌细胞、心肌细胞等影响的研究初步探明其可能机制。本项目的完成有望为减轻心脏移植术后慢性移植物血管病的治疗提供一种新思路；为提高免疫抑制治疗的靶向性提供一种新方法。

基本完成该项目的研究计划目标。前期在体研究发现干预p40可以明显减轻小鼠心脏移植急性排斥反应，但对慢性心脏移植物存活时间的作用仍未知。该项目中，我们进一步证实干预p40可以明显延长慢性心脏移植物存活时间。通过建立心脏移植慢性排斥模型（BM12-C57）,术后持续监测移植物存活时间，我们的实验结果首先证实干预P40对延长心脏移植物存活时间的作用是确定的，进一步的病理结果显示慢性移植物血管堵塞程度以及炎症细胞浸润程度均明显减轻。通过对细胞效应因子及细胞亚型的进一步研究分析，结果表明干预P40明显减轻慢性移植物局部效应因子的表达和不同效应细胞的浸润。进一步的机制研究表明，干预P40明显抑制ɣδ T cells的功能，这构成延长慢性移植物存活时间的主要因素之一。记忆性T细胞一直是影响慢性移植物存活时间的决定因素，通过建立体外培养模型，基因芯片的结果显示记忆性T细胞与初始T细胞存在很大的基因表达差异。干预p40所取得的延长慢性心脏移植物存活时间的作用可能与干预记忆T细胞的功能有关，我们将比较干预P40对记忆性T细胞基因表达的影响，更深入的挖掘干预P40对排斥反应的作用机理。