结外鼻型NK/T细胞淋巴瘤细胞分化及其肿瘤干细胞筛选与验证

结外鼻型NK/T细胞淋巴瘤细胞分化状态及其肿瘤干细胞是相关领域研究热点及难点。我们前期工作发现该肿瘤细胞呈梯度分化特征，在分化最顶端的瘤细胞为CD34+CD38+CD7+表型，与正常NK祖细胞相似，提示该细胞群可能是ENKTCL-N的CSC。本课题设计将首先用磁珠结FACS分选获取最上游细胞群，进行培养成球实验、分化实验和异体种植成瘤实验，验证其干细胞特性，并长期培养成球的CSC；采用Illumina芯片检测CSC与下游细胞群的差异表达基因，选择其中2-4个呈明显过表达基因为目的基因；以siRNA技术沉默目的基因后，经体内、外实验观察其对瘤细胞生长的影响。分析CD56+CD16-和CD56-/dimCD16+表型肿瘤在临床病理和预后的异同，旨在阐明ENKTCL-N瘤细胞分化状态及其与该肿瘤临床和生物学行为的关系。试筛选并验证其肿瘤干细胞，寻找其CSC相关基因，为该肿瘤分子靶向治疗积累资料。

本课题分为四个部分：（1）通过对人结外鼻型NK/T细胞淋巴瘤（ENKTCL-N）肿瘤细胞分化状态的研究，发现该肿瘤呈梯度分化状态，有五个与正常NK细胞发育阶段相似的免疫表型细胞群，推测ENKTCL-N之肿瘤干细胞存在于CD34+CD38+ CD7+细胞群中。依此理论，ENKTCL-N存在两种免疫表型，即CD56brightCD16-和CD56dimCD16bright两种亚型，CD56bright患者的生存率低于CD16bright患者。（2）ENKTCL-N全基因组表达谱芯片检测显示MMPs家族成员MMP-2和MMP-9的过表达与ENKTCL-N较差的预后密切相关；推测MMP-2和MMP-9可以做为未来治疗ENKTCL-N的靶点。（3）通过大样本淋巴组织肿瘤的构成分析，发现ENKTCL-N占非霍奇金淋巴瘤的17%，高于文献报道；并对一些非鼻ENKTCL-N进行了系列临床病理观察与研究。（4）进行了PRDM1在ENKTCL-N的突变及表达的初步观察，为下一步研究PRDM1在ENKTCL-N的肿瘤抑制基因作用及其分子机制奠定了基础。.本课题按时完成，在该课题的资助下，截止至2012年12月，我们已发表相关研究论文9篇，其中SCI论文6篇，中文核心期刊3篇；另待发表3篇，其中1篇已投稿，2篇正在撰写中。