IL-33 在类风湿关节炎发病中作用机制的实验研究

IL-33是一种新近发现的细胞因子，其生物功能尚不明确。该因子主要表达于滑膜细胞的胞核内，具有潜在的核因子样作用；同时，IL-33还可释放至细胞外。近期研究发现，IL-33在类风湿关节炎（RA）患者外周血、滑液及滑膜细胞中均特异性地异常增多，并与病情轻重、特异性自身抗体滴度等临床指标相关。此外，有研究证明IL-33是多种RA动物模型发病的关键分子，但其机制不清楚。本研究将就IL-33对RA滑膜炎症的产生和骨破坏的影响这一关键问题，以RA患者滑膜组织和小鼠胶原诱导关节炎（CIA）模型为平台，采用小干扰RNA（siRNA）基因敲低手段，通过同时阻断IL-33的核因子样作用和外分泌，分别从体内和体外等多方面探索IL-33在RA中的分子和细胞水平的作用机制，为寻找新的RA特异性治疗靶点提供实验依据。

类风湿关节炎（RA）是一种以关节滑膜炎和骨破坏为病理基础的自身免疫病，细胞因子IL-33及其受体ST2在RA患者的滑膜组织中均过量表达，且主要表达于成纤维样滑膜细胞(FLS)，但其作用机制不明确。FLS是介导关节破坏及滑膜炎症的主要效应细胞。本课题组在前期研究的基础上，主要研究发现包括：.1、分别检测RA与患者血清及关节滑液中IL-33及其游离受体sST2的水平，发现① RA患者血清和关节液中IL-33水平显著高于作为对照组，但血清中IL-33水平显著高于关节滑液中的水平。②关节液IL-33的水平与RA临床特征的联系更显著，与RA疾病活动度及自身抗体的水平显著相关。提示IL-33在RA的病理过程中起到重要的作用。.2、通过HapMap数据库确定IL-33相关SNP位点进行验证，发现①rs7044343的CC基因型与RA相关，尤其是ACPA阴性的RA。②rs7044343位点为CC的RA患者具有更低的血清IL-33水平。提示rs7044343 CC基因型可能下调RA中IL-33的表达，对RA有保护性作用。.3、分别用IL-33转基因鼠和野生组C57BL/6J小鼠构建CIA模型，结果发现IL-33转基因组和野生组的CIA发病时间相似，但转基因组的发病率明显高于野生组，关节炎临床评分也显著高于野生组。IL-33转基因鼠的骨破坏加重。.4、采用siRNA敲低手段，阻断RA患者滑膜组织中IL-33的表达。结果发现siRNA抑制FLS IL-33的表达后可下调FLS IL-6，IL-8，MMP2，MMP3，MMP9及MCP-1 mRNA和蛋白的表达，并明显降低FLS活化侵袭及增殖的能力。此外，sST2蛋白亦可抑制RA FLS的IL-33和IL-1β表达。.本课题从多角度研究了IL-33在类风湿关节炎发病中的作用,为发现类风湿性关节炎免疫治疗的新途径奠定了基础。本项目已完成论文4 篇,包括英文论文 3 篇，中文论文1篇。参加学术会议多次，获国际学术奖励 1 次。课题组培养博士研究生2 名,硕士研究生 1 名。达到了预期研究目标。