miR-296和miR-483在食管癌发生中的调控作用及分子机制

我们率先发现miR-296和miR-483在食管癌中高表达（Hong L, et al. Ann Surg. 2010;251:1056-63）；还发现下调miR-296和miR-483可以抑制食管癌细胞的生长；下调miR-296可以逆转食管癌细胞的多药耐药表型，促进药物诱导的细胞凋亡，并上调候选抑癌基因ZNRD1的表达。因此，我们推测二者在食管癌发生中起重要作用。本研究拟利用Real-time PCR等技术研究miR-296和miR-483的表达与食管癌发生及预后的相关性，借助体内外实验研究miR-296和miR-483对食管癌细胞生物学行为的影响，通过稳定同位素标记蛋白质谱、RISC免疫共沉淀等方法筛选miR-296和miR-483的靶分子，并利用免疫组化、干预试验等技术探讨6-10个靶分子在食管癌发生中的表达和功能。以期为深入理解食管癌发生的分子机制和探讨新的基因治疗方法奠定基础。

miR-296和miR-483可能通过调控多个靶基因的转录参与多种肿瘤的发生发展。本课题拟利用Real-time PCR等技术研究miR-296和miR-483的表达与食管癌发生及预后的相关性，借助体内外实验研究miR-296和miR-483对食管癌细胞生物学行为的影响，并探索miR-296和miR-483参与食管癌发生的调控途径。在本课题的资助下，我们率先研究了miR-296和miR-483在食管癌发生中的调控作用及其分子机制；目前已顺利完成课题计划，发表SCI论文13篇，主编专著3部，获得专利2项，参与获得陕西省科技奖一等奖1项。Real-time PCR和生存分析结果显示，miR-296和miR-483在食管癌中明显高表达，且和预后负相关；建立了多个高/低表达miR-296和miR-483的细胞模型，体内外实验结果表明，上调miR-483可显著促进食管癌细胞的增殖、迁移，促进细胞周期由G1期向G2期转化，减少药物诱导的细胞凋亡，减弱细胞对化疗药物的敏感性；上调miR-296可显著促进食管癌细胞的增殖、侵袭和耐药；miR-483的上游分子是c-Myc，下游靶分子是EI24，miR-296的下游靶分子是ZNRD1和P-gp。综上所述，c-Myc/miR-483/EI24和miR-296/ZNRD1/P-gp分子通路在食管癌发生发展中扮演重要角色，它们在肿瘤基因治疗中具有较好的临床应用前景。本项研究为深入理解食管癌发生的分子机制和探讨新的基因治疗方法奠定了基础。