人类Tudor-SN蛋白在细胞应激颗粒（SGs）与加工体（PBs）间的穿梭机制研究

人类Tudor-SN蛋白是一种广泛存在的多功能蛋白，参于基因转录、pre-mRNA剪接、RNA干扰等过程。本课题组一直从事相关研究，最新发现Tudor-SN可与一些mRNA结合并参与细胞应激颗粒（SGs）和加工体（PBs）的形成。SGs和PBs是细胞应激时产生的胞浆颗粒，与mRNA穿梭运动、降解代谢等密切相关。本项目旨在研究Tudor-SN护送特定mRNA在SGs和PBs间的穿梭机制，通过荧光漂白后恢复、三荧光动态共定位、RNA干扰、X射线晶体结构、MS2-GFP标记等方法分析Tudor-SN的SGs/PBs穿梭动力学特性；筛选并确定与之相结合的应激蛋白和mRNA类型；观察应激时Tudor-SN及其各片段与特定mRNA、SGs、PBs的动态共定位情况；深入解析其蛋白晶体结构，有助于揭示Tudor-SN在RNA代谢、病毒感染、细胞凋亡、机体防御以及哮喘、结肠癌等多种临床相关疾病中的作用机制。

应激颗粒与加工体是真核细胞受到氧化应激、热休克、紫外线照射及病毒感染等各种环境刺激时在胞浆中产生的与mRNA代谢密切相关的颗粒状结构。本课题组前期结果表明当HeLa细胞受到外界刺激时Tudor-SN蛋白可以参与胞浆中SGs的组装。本项目旨在进一步分析Tudor-SN蛋白的应激动力学属性及其在SGs组装动力学中的作用机制。目前本项目已经完成，主要的实验结论：1）Tudor-SN蛋白是一种SGs特异性蛋白，具有核浆穿梭特性，后者参与 Tudor-SN蛋白颗粒呈现高度动态性的组装过程。2）Tudor-SN与PABP1、TIAR等多种应激蛋白以及poly(A)+ mRNA相互作用，形成应激蛋白-核酸复合物，共同参与细胞胞浆SGs结构的形成。3）Tudor-SN蛋白对于多聚核糖体的应激解聚过程并无影响，但可调控SGs蛋白-核酸成分（如G3BP蛋白、AGTR1-3'UTR）的应激组装动力学行为。. 通过对于该项目课题的研究，现以第一作者或共同第一作者发表SCI论文3篇（J Biol Chem. 2012； J Inorg Biochem. 2014； FEBS Lett. 2014），中文核心期刊9篇; 以第二作者申请国家专利3项，以第三作者申请国家专利1项，以参与作者发表中文核心期刊2篇。另有一篇SCI论文（FEBS J, 2014 )处于修改后二审阶段。上述所取得的成果已达到项目的结题要求。本课题今后预从磷酸化、泛素化修饰角度探讨Tudor-SN蛋白在应激颗粒中的形成机制。