力感应细胞源性外泌体通过组织因子促进骨组织血管生成的机制研究

Angiogenesis plays a crucial role in the occurrence and development of osteoporosis, increasing angiogenesis is a potential means for treatment of osteoporosis. Latest researches indicated that the exosome-derived tissue factor (TF) has the characteristic for promoting angiogenesis, but the mechanism remains elusive in bone tissue. On the basis of previous findings, we intend to verify that 1) the relationship between the mechanical load, expression of TF and capillary density in bone tissue through human bone sample analysis; 2) the difference of TF expression in different force-sensing cells under mechanical stimulation by means of ELISA, PCR and other methods; and determine the source of TF-bearing exosome; 3) the effect of exosome-derived TF and recombinant TF on the proliferation and migration of endothelial cells in bone tissue, and to filtrate the effect of TF in downstream molecular targets by high-throughput mass spectrometry and bioinformatics analysis. Exploring the role of TF-containing exosomes in promoting bone angiogenesis is helpful to elucidate the mechanism of osteoporosis and may provide new ideas and methods for treatment.

血管生成减少是骨质疏松发生、发展的重要环节，增加血管生成是治疗骨质疏松症的潜在手段。最新研究发现：外泌体来源组织因子（TF）具备促进血管生成的特性，然而其在骨组织中的作用机制尚未明确。本项目拟在前期研究基础上：1、通过临床样本分析，明确骨组织中力学载荷、TF表达水平以及血管密度之间的关系；2、利用ELISA、PCR等方法检测力学刺激下不同力感应细胞TF表达差异，明确高表达TF外泌体的细胞来源；通过免疫电镜等方法，证实力感应细胞内增高的TF通过外泌体途径出胞；3、观察外泌体来源TF及重组TF对骨组织内皮细胞增殖、迁移的影响，采用高通量质谱及生物信息学分析等方法筛选TF作用的下游分子靶点。探索含TF外泌体在骨组织中促进血管生成的作用，有助于阐明骨质疏松发生机制，并为治疗提供新的思路和方法。

血管生成减少是骨质疏松发生、发展的重要环节，增加血管生成是治疗骨质疏松症的潜在手段。最新研究发现：外泌体来源组织因子(TF)具备促进血管生成的特性，然而其在骨组织中的作用机制尚未明确。本项目拟在前期研究基础上：1、通过临床样本分析，明确骨组织中力学载荷、血管、骨密度之间的关系；2、利用体外实验模拟力学刺激下不同力感应细胞功能活性改变，探索细胞内相关基因表达差异。3. 明确外泌体来源TF影响内皮细胞功能的作用机制。通过构建骨质疏松动物模型，收集血管内皮细胞，验证外泌体来源TF对内皮细胞分化的影响；进一步采用高通量基因芯片等方法筛选下游分子靶点。探索含TF外泌体在骨组织中促进血管生成的作用，有助于阐明骨质疏松发生机制，并为治疗提供新的思路和方法。