主要海水养殖鱼类获得性免疫应答动态的研究

海水养殖鱼类是我国重要的水产养殖经济动物之一，作为拥有获得性免疫系统的低等脊椎动物，对其获得性免疫应答规律的深入研究可为疫苗接种策略和鱼类疾病的免疫防治提供重要理论基础，是当前鱼类免疫学研究的热点。本项目在前期研制获得抗牙鲆免疫球蛋白单克隆抗体的基础上，针对大菱鲆、许氏平鮋和花鲈等北方重要海水养殖鱼类，分离纯化免疫球蛋白，比较分析结构特性并研制其单克隆抗体；利用单抗开展鱼类免疫球蛋白抗原交叉特性；监测比较鱼类在免疫不同类型病原后细胞应答特性和抗体变化动态；调查研究影响鱼类获得性免疫应答水平的主要因素及其影响程度；在揭示鱼类获得性免疫应答特点的基础上，为疫苗最佳接种时机、疫苗效果评价和鱼体抗病力评估提供理论依据和技术支撑。

海水鱼类获得性免疫应答的研究是鱼类疫苗接种策略和疾病免疫防治的重要理论基础。项目在国家自然科学基金（31172429）资助下，开展了主要海水养殖鱼类免疫球蛋白特性的研究；监测比较了鱼类在接种不同类型免疫原后细胞应答特性和抗体变化动态以及基因表达变化；研究了影响鱼类获得性免疫应答水平的主要因素及其影响程度等。取得的主要创新成果：分离纯化出半滑舌鳎、鲈、大菱鲆、真鲷、许氏平鮋的免疫球蛋白，鉴定了免疫球蛋白结构特性，研制出抗大菱鲆免疫球蛋白单克隆抗体、抗许氏平鲉免疫球蛋白单克隆抗体，利用单抗研究了主要养殖鱼类免疫球蛋白抗原交叉特性，以及牙鲆、大菱鲆、许氏平鲉分泌抗体（smIg+）的淋巴细胞在不同组织中的分布比例以及病原感染后smIg+细胞在不同组织中的动态变化；制备了牙鲆粘液免疫球蛋白的单抗，分析了血清以及粘液免疫球蛋白的差异性；克隆获得了牙鲆B淋巴细胞表面标志分子CD79b的全长基因序列并研究了其在牙鲆各个组织的分布及转录水平，构建了原核表达载体获得了CD79b重组蛋白及其多克隆抗体，研究了CD79b蛋白的特性及其在牙鲆B淋巴细胞表面的分布规律；克隆获得了大菱鲆Toll样受体-3基因、研究了其在组织内的分布、病原感染后其表达差异；研究了牙鲆多聚免疫球蛋白受体在黏液组织中的分布及其免疫应答特性；研究了牙鲆浸泡免疫，其体内细胞免疫应答和体液免疫应答动态变化过程，分析了体液免疫与黏膜免疫之间的相互联系，及其与免疫保护的关联性。项目研究结果丰富了海水鱼类获得性免疫应答的理论基础，为疫苗接种策略和疫苗效果评价提供了理论依据。发表标注本项目资助论文24篇，其中SCI收录11篇，项目成果获授权国家发明专利2项，受理3项。