树突状细胞调控形成高表达IL-25鼻息肉内型Th2炎症的作用和机制探讨

Precise treatment based on disease endotype is the future treatment mode of nasal polyps. We recently reported that a nasal polyp (NP) endotype with highly expressed IL-25 has more severe features of tissue Th2 inflammation and clinical symptoms. However, its pathogenesis remains unclear. Dendritic cell (DC) finely regulates Th2 inflammation in airway mucosa. Our previous study found that IL-25 can enhance the Th2 polarization of IL-17RB+ DC, and that there is a significant positive correlation between IL-17RB+ DC and IL-25 and Th2 cytokines in NP. Therefore, we hypothesize that IL-25 may induce Th2 inflammation by regulating the Th2 function of IL-17RB+ DC in NP, thus forming the immunopathological features of NP. In this study, we intent to isolate IL-17RB+ DCs and co-culture with T cells in vitro, and study the relationship between IL-17RB+ DC and IL-25, Th2 inflammation in NP, investigate the effects of IL-25 on IL-17RB+ DC immune function and explore their intracellular signal transduction mechanism. The results of this study will provide experimental evidence for further understanding of the pathogenesis of this NP endotype and contribute to the development of precise intervention targets.

基于疾病内型进行精准治疗是未来鼻息肉（NP）的治疗模式，我们最近报道了一种高表达IL-25的NP内型具有更严重组织Th2炎症和临床症状的特征，但发病机理仍不清。树突状细胞（DC）精细调控了气道黏膜Th2炎症。我们前期发现IL-25能够增强IL-17RB+ DC的Th2极化功能，并且在NP中高表达的IL-17RB+ DC和IL-25以及Th2因子水平显著正相关，据此我们提出科学假设：NP中高表达的IL-25可能通过调控靶细胞IL-17RB+ DC的促Th2功能，诱导产生组织Th2炎症。本研究拟分离组织IL-17RB+ DC，体外建立其和T细胞的共培养体系，采用阻断/中和等策略，研究组织IL-17RB+ DC和IL-25、Th2炎症的关系；明确IL-25对IL-17RB+ DC功能的调控作用和胞内信号转导机制。本研究结果将为深入理解该内型NP的发病机理，以及开发精准干预靶点提供实验依据。

最近我们报道了一种高表达IL-25的慢性鼻窦炎伴鼻息肉内型，该内型具有更严重的组织嗜酸粒细胞性炎症和Th2型炎症，更严重临床症状，以及更依赖糖皮质激素治疗的特征。但IL-25诱导产生该内型鼻息肉的发病机理仍一无所知。在本项目的资助下，我们探讨了IL-17RB+树突状细胞（DC）和鼻息肉Th2型炎症的相关性，IL-25对IL-17RB+ DC的表型、功能的调控效应，以及IL-25调控IL-17RB+ DC的潜在分子机制。实验结果发现鼻息肉组织中IL-25和IL-17RB+ DC，以及鼻息肉的Th2炎症具有显著相关性，IL-25可能通过调控IL-17RB+ DC诱导产生了局部 Th2 炎症反应。进一步的实验表明IL-25能显著上调CD1c+DC表达OX40L（促Th2功能的表型标志物）的水平，并且IL-25、IL-33和TSLP三者同时联合刺激比单独或两两联合刺激均能更加明显上调OX40L的表达。进一步采用IL-25、IL-33和TSLP单独或两两联合、三种共同联合刺激后的DC对CD4+T细胞进行功能试验，结果证实了IL-25、IL-33和TSLP单独刺激的DC具有增强的促Th2功能作用，表现为CD4+T细胞胞内IL-4、IL-5和IL-13因子水平的升高，并且IL-25、IL-33和TSLP三者共同刺激能够进一步增强DC的这种促Th2作用。采用IL-25、IL-33和TSLP信号阻断剂的功能实验也验证了上述结论的可靠性。这些结果表明IL-25不仅能够促进DC的Th2极化功能，而且还可能和IL-33、TSLP协同产生更强的促DC极化Th2作用。我们还进一步探讨了诱导DC表达IL-17RB、ST2和TSLPR的上游刺激信号，结果发现所有Toll样受体的配体刺激后，DC均能不同程度地显著上调IL-17RB的表达水平，其中Der.p1刺激后IL-17RB的上调比例最高，平均约为65%。这些结果不仅表明DC表达IL-17RB等的上游诱导信号，也为我们后续进一步体外诱导IL-17RB+DC亚群进行功能实验奠定了重要的实验基础。本项目已达到了既定的研究目标，相关研究成果发表了SCI论著7篇，培养毕业博士研究生2名，出站博士后1名。项目负责人获得了中山大学优秀博士后、深圳市高层次专业人才和深圳市卫生健康菁英人才等荣誉。