新型抗炎生物肽对自身免疫性葡萄膜炎的作用及机制研究

Uveitis is a common intraocular autoimmune disease, which is usually recurrent and refractory to treatment. Corticosteroids remain the mainstay of treatment of uveitis, however, it can cause multiple side effects, such as cataract, glaucoma, diabetes, and osteoporosis. Therefore, it is still lack of ideal method in clinical treatment. Recently, it is reported that adiponectin, an endogenous protein, has a significant inhibitory effect on several autoimmune diseases and we successfully identified a 23-amino-acid peptide which greatly attenuated inflammatory responses in endotoxin-induced uveitis in rats and dose-dependently reduced inflammatory cytokine production in LPS-stimulated RAW264.7 cells without causing corticosteroids-associated side effects of glaucoma and cataract (The patent for invention has been applied.).Based on these findings, we will further investigate the effect of the peptide on experimental autoimmune uveitis and explore the possible mechanisms. The purpose of this study is to illustrate the effect and mechanisms of the peptide in ocular autoimmune uveitis in order to find a potential alternative for the management of ocular inflammatory and immune disease.

葡萄膜炎是一类眼部常见的自身免疫性疾病，具有反复发作、治疗困难、致盲性高等特点。糖皮质激素是其目前主要的治疗药物，但易导致白内障、青光眼、糖尿病、骨质疏松等并发症，故目前较缺乏治疗效果好、副作用小的药物。新近文献报道内源性蛋白脂联素具有抑制自身免疫性疾病的作用，本课题组从中筛选获得了一由23个氨基酸组成的多肽，能显著抑制内毒素诱导的大鼠葡萄膜炎，下调巨噬细胞促炎症因子的分泌，且眼局部组织安全性好、无高眼压和晶体混浊等的并发症（申请发明专利已受理）。本课题组将在此基础上，进一步探索该多肽对实验性自身免疫性葡萄膜炎的干预作用，检测实验中各组大鼠细胞免疫应答强度，并探讨多肽对实验鼠脾和淋巴结淋巴细胞活化、增殖及趋化活性的影响，以明确多肽对自身免疫性葡萄膜炎的抑制作用及机制，望发现一种能显著抑制眼部免疫炎症反应、作用机制明确的新型小分子活性肽，为临床葡萄膜炎的治疗寻找新的途径，争取向临床成果转化。

葡萄膜炎是一类眼部常见的自身免疫性疾病，具有反复发作、治疗困难、致盲性高等特点。糖皮质激素是其目前主要的治疗药物，但易导致白内障、青光眼、糖尿病、骨质疏松等并发症，故目前较缺乏治疗效果好、副作用小的药物。本课题组从具有自身免疫抑制作用的内源性蛋白脂联素中筛选获得了一由23个氨基酸组成的多肽，研究发现能显著抑制内毒素诱导的大鼠葡萄膜炎，下调巨噬细胞促炎症因子的分泌，且眼局部组织安全性好。本课题以这些发现为基础，建立实验性自身免疫性葡萄膜炎（experimental autoimmune uveitis, EAU）模型，证实了多肽干预治疗可有效减轻小鼠眼部葡萄膜炎的临床症状及眼底视网膜组织的损伤，减少眼房水中炎症细胞和蛋白质的渗出，同时可显著抑制IL-17A、IL-6、TNF-α和IFN-γ炎症因子的释放；进一步小鼠体内脾脏和淋巴结中淋巴细胞提取后流式分析发现，多肽治疗可明显减低EAU小鼠体内CD4+IFN-γ+细胞和CD4+IL-17A+细胞的比例，提示多肽干预可能通过缓解EAU小鼠体内Th1和Th17细胞两种致病性T细胞的增殖和免疫应答，从而减少IL-17A和IFN-γ等炎症因子产生；小鼠眼组织匀浆免疫印迹检测显示多肽可抑制EAU小鼠眼内IκBα和NF-κBp65的磷酸化水平，提示它可能通过抑制NF-κB信号通路的激活，继而减少炎症因子的分泌。通过本课题组的研究显示，筛选获得的内源性生物肽具有明确的免疫抑制作用，有望成为临床葡萄膜炎治疗的新手段，目前申请的专利已授权，具有向临床成果转化的潜能。