乙肝患者体内髓源抑制细胞的分布与免疫抑制功能研究

The immuneresponses in hepatitis B virus (HBV)infection and chronification is still not clearly understood. Most of the studies related with immune regulation in chronic HBV infection focus on the regulatory T cells (Treg), but only limited data is avaible concerning myeloid derived suppressor cells (MDSC)in HBV infection. MDSC has been reported to be cumulated in various virus infection, and suppress T or NK cell responses. And the most important is, our preliminary data showed a significant increase of MDSC, both frequency and absolute cell number, in periferal blood from HBV infected patients than that from healthy donors. According to our data and the published results concerning MDSC and many other virus infection, we assume MDSC also play a role in HVB infection and chonic infection. To verify that, we plan to analyze the distribution, sub-population, phenotype, immune suppressive ability and mechanism of MDSC in blood or liver tissue samples from HBV infected patients in different pathogenic stage. Our goal is to understanding the role of MDSC in HBV infection, and the correlation of MDSC and HBV infection pathology progress. The results of this study will illustrate a novel potential immune suppression mechanism in HBV infection and chonification， which will provide a new target for clinic immune therapy against HBV infection.

乙型肝炎病毒（HBV）引起慢性乙肝的免疫应答机理仍缺乏清晰的认识。尽管目前关于调节T细胞（Treg）免疫耐受与慢性乙肝的研究较多，但有关髓源抑制细胞（MDSC）还不够深入。MDSC能被多种病毒感染所诱导积累，并抑制T细胞或NK细胞的抗病毒免疫反应，但其在HBV感染中的研究尚不多见。申请人前期实验已经发现乙肝患者外周血中的MDSC频率和绝对数量都显着高于健康对照。基于与实验结果并结合MDSC在其它多种病毒感染中的研究报告，我们推测MDSC在HBV感染和慢性乙肝中发挥一定作用。为验证该推论，本项目计划利用不同病程乙肝患者的外周血和肝组织作为样本，分析MDSC在分布、亚群组成、表型、免疫抑制能力和机理等方面的区别，研究MDSC在HBV感染中的免疫抑制作用，并通过对比临床数据，了解MDSC和乙肝病程发展的相关性，以期最终揭示一种新的HBV感染以及慢性乙肝相关的免疫抑制机制，为临床治疗提供新靶标。

关于乙型肝炎病毒（HBV）感染过程中免疫耐受的研究多集中于调节T细胞（Treg），而髓源抑制细胞（MDSC）与HBV感染是否相关仍鲜有了解。前期对10名健康对照和10位HBV感染者外周血样本检测所获得的初步结果显示MDSC在HBV患者外周血中的绝对数量和占PBMC的百分比均显著上升，但在项目正式推进过程中进一步扩大样本量（>100例）后发现，尽管MDSC在HBV感染者外周血中的百分比和数量略有上升，但其与健康组的区别远未达到统计学意义的显著性差异，且其抑制T细胞反应的能力以及亚群分布和抑制效应均无明显区别，说明MDSC可能在HBV感染及慢性化过程中无直接作用，还存在其它有待于揭示的免疫调节机制。因无法按照原定研究计划推进本研究，我们在后期调整了研究方向，根据前期部分结果研究了CRTC2对HBV的转录和复制的影响，此外还研究了槲皮素和硒这两种小分子药物对HBV复制的抑制效应。结果发现CRTC2可通过促进PCG1α的表达激活HBV复制和转录，提示了HBV感染过程与糖代谢之间的相关性，并为临床治疗提供了可能的新靶点；并证明了亚硒酸钠和槲皮素可显著降低HBV在细胞内的转录和基因组复制水平，为HBV治疗的临床药物研发提供了2种潜在选择对象。