肝硬化病人肝细胞组胺H1、H2受体的RNA表型研究

从鼠脑提取H2R的RNA做反转录模板，得到DNA做PCR反应模板，PCR产物转入质粒测序。转化扩增质粒，提取DNA做酶切鉴定，标记成杂交针，做Northern斑点杂交，以肝组织RNA做原位杂交。成功制备了检测H2RmRNA的DNA探针。发现鼠及人肝组织均有H2R表达。正常肝组织表达远高于肝硬化组织，大鼠肝硬化纤维组织没有H2R表达。首创原位杂交方法检测mRNA表达H2R异常，证明质粒扩增方法较常规RT-PCR扩增成探针更有效。结果表明肝硬化时H2R数量减少是与mRNA表达下降有关，肝硬化时组织胺代谢紊乱有其分子生物学基础，而H1R的mRNA表达水平变化有待于今后沿同样方法进行检测结果加以证实。在方法学上为进行同类研究提供了研究工作基础。