两亲性超支化聚阳离子自组装囊泡模拟病毒基因载体的研究

分别通过click反应和Michael反应将亲水链较长的不同分子量的聚阳离子多肽聚赖氨酸和亲水链较短的寡聚胺引入以超支化聚醚为疏水核的外层，得到亲水链较长的超支化聚合物和亲水链较短的"平头状"超支化阳离子聚合物。研究超支化阳离子聚合物在水中的自组装行为，调控超支化阳离子聚合物囊泡形成的条件。由于聚合物囊泡具有类似生物膜的性质，因此选择尺寸适宜、性能最佳的聚合物囊泡模拟病毒基因载体，作为新型的基因传递系统。以治疗基因p53作为肿瘤抑制基因，用阳离子聚合物囊泡模拟有囊膜的病毒基因载体与p53形成复合物，将复合物注入裸鼠体内，研究模拟病毒基因载体的阳离子聚合物囊泡携带p53基因对抑制肿瘤迁移和抑制肿瘤生长的作用。

该项目的研究工作主要是制备了一系列阳离子高分子和多肽材料作为新型的基因传递系统。合成的阳离子高分子包括寡胺接枝超支化聚醚和通过ATRP法制备的聚（甲基丙烯酸氨乙酯-b-N,N-二乙基氨乙基甲基丙烯酸酯）。多肽材料主要包括还原敏感的多肽和胆固醇修饰的多肽。利用琼脂糖凝胶电泳实验考察了材料对DNA的络合能力,结果表明材料可以有效地络合DNA。进一步利用纳米粒度仪、扫描电镜、投射电镜等手段考察了材料/DNA复合物的一些物理化学性能，结果表明，这些复合物具有细胞内吞的合适粒径。利用MTT法测定了材料的体外细胞毒性，结果表明制备的材料的细胞毒性远远低于商品化的25 kDa PEI的细胞毒性体外转染实验，以25 kDa PEI作为阳性对照，考察了材料携带质粒DNA的转染效率，转染结果表明，制备的阳离子材料的转染效率略高于或相当25 kDa PEI的转染效率。所有的测试结果表明该研究工作中制备的材料作为基因载体有很大的应用前景。在项目的后续工作中将筛选出合适的材料用于体内动物实验研究。