等离子体质谱及其联用技术在蛋白质定量中的方法研究

本项目以等离子体质谱（ICP-MS）及其联用技术为主要研究手段，结合电喷雾质谱(ESI-MS)等有机质谱技术进行定性和表征，建立金属/金属络合物标示蛋白质定量分析的新方法，并获得相关蛋白质的结构信息，为蛋白质组学研究提供必要的技术平台和数据基础。本项目的完成不仅可以拓宽ICP-MS及其联用技术的应用领域，为相关学科的研究提供重要的科学实验数据和信息，而且对于分析化学学科（特别是原子质谱）的发展和学术水平的提高，均具有重要的学术意义。

本项目以等离子体质谱(ICP-MS)及其联用技术为主要手段，探索了基于不同金属(Cd，Hg，Pb)及纳米粒子(纳米金，纳米银)的蛋白标记体系，优化了标记条件，并基于此建立了金属/纳米粒子标记-ICP-MS蛋白质定量分析新方法，全面评价了其分析性能，实现了人血清中癌症标志物癌胚抗原的高灵敏检测，多种糖蛋白(如触珠蛋白、血红素结合蛋白和卵清蛋白等)的同时定量，以及Jurkat T细胞的特异性识别和低水平检测(检出限为86个Jurkat T细胞)；所建立的方法具有成本低，操作简单，选择性好，检出限低，样品和试剂消耗少，避免引入污染等优点。另外，以金属硫蛋白为研究对象，在毛细管电泳中比较了不同在柱富集技术(阴离子耗尽和大体积样品堆积)的分析性能；采用ICP-MS联用技术结合有机质谱，系统考察了量子点/纳米银诱导作用下细胞中金属硫蛋白的变化情况。本项目的完成为生物样品中疾病标志蛋白的高灵敏检测提供了有效的技术平台，为纳米粒子的生物安全性研究提供了基础数据和新的思路。