Let-7c调控TRB2相关因子参与DMC致白血病细胞凋亡机制

Let-7家族是一种抑癌基因miRNA，let-7家族在多种肿瘤细胞中表达显著下调，let-7c是抑癌let-7家族报道较甚少的一个miRNA分子，其调控靶基因有待深入探讨。.以往研究中我们应用siRNA抑制了α珠蛋白等在细胞和小鼠体内表达，并建立了miRNA检测和研究的工作基础，本课题将进一步利用基因信息学软件、分子生物学等技术，设计实验寻找去甲斑蝥素（DMC）作用的新靶点，探讨let-7c和DMC在肿瘤临床治疗中的应用。研究发现DMC可诱导凋亡白血病细胞let-7c表达明显增高，还发现let-7c可以调控新因子TRB2表达，后者在急性髓性白血病发生中起了重要作用。用DMC处理白血病细胞，可使TRB2表达下降。上述结果为开展Let-7c调控TRB2相关因子参与DMC致白血病细胞凋亡的研究打下基础，本研究将为let-7c在肿瘤分子诊断中的作用及DMC在肿瘤临床治疗中的应用提供科学资料。

本研究我们应用基因信息学软件、分子生物学等技术方法，探讨去甲斑蝥素（DMC）作用的新靶点，研究let-7c 和DMC 在肿瘤临床治疗中的应用。我们完成了研究计划的第一部分,利用miRNA分析软件,找到let-7c的作用靶点可能为TRB2基因。进而构建了含TRB2-3’UTR的pcDNA-GFP-UTR载体，将let-7c和载体共处理细胞，发现let-7c组GFP表达降低，表明let-7c可调节TRB2-3’UTR。Western Blot结果证实let-7c可调节TRB2的表达，为进一步开展Let-7c 调控TRB2相关因子参与DMC 致白血病细胞凋亡的研究打下基础。