不同手法针刺通过机械力调控关节炎大鼠局部组织中肥大细胞的效应机制研究

During the rapid development, the immunology research of China also faces many challenges, like imbalance of disciplinary development and lack of substantive cross to other subjects. Immune mechanics have got many attentions, but the conservative of its research method system restricted the further development of this subject. It has shown that acupuncture is effective to alleviate inflammatory pain. Studies have shown that Mast cells and Mechano-Sensitive Channel may play the mediating role in acupuncture relieving inflammatory pain. Combining previous and our own preliminary results, we considered that the anti-inflammatory and analgesic effect of different kind of manual acupuncture directly involved in regulating activities of Mast cells in local inflammatory tissues by the Extracellular matrix-Adhesion factor-Cytoskeleton mechanical signal transduction pathway. In order to prove this hypothesis, the rat model with inflammatory pain on the foot was used in this study. By stimulating acupoints beside the inflammatory tissue with different kind of manual acupuncture, the rat model was examined with behavior, histochemical and molecular biological methods on the changes of pain threshold, chemical expression of Mast cells and related neuro-immune factors in local inflammatory tissues where we also focused our observation on the signal transmission mechanism of Immune mechanics. Through this study we may not only reveal neuro-immune-biomechanical mechanisms of the anti-inflammatory and analgesic effect of acupuncture, but also bring new possibilities for the immune mechanics research.

我国免疫学研究蓬勃发展的同时，也面临着学科发展不够平衡、与相关学科的实质性交叉不足等挑战。免疫力学作为免疫学和生物力学的有机结合越来越得到重视，但其研究方法体系的固守相对制约着学科的深入发展。针灸缓解炎性痛的有效性已经在临床和实验研究得到证实。最近研究表明肥大细胞和力学敏感通道可能在其中发挥了重要作用。结合以往及本团队的初步研究我们认为不同手法针刺通过胞外基质-黏附因子-细胞骨架力学信号传导系统调控炎性局部组织中肥大细胞发挥针刺效应。为了证实这一假说，本研究拟以佐剂型关节炎模型大鼠为研究对象，通过不同手法针刺炎性区域附近穴位，从行为学、组织化学和分子生物学等方面分别观察模型大鼠痛阈、炎性组织中肥大细胞及相关神经免疫化学成分的表达变化，并在此基础上重点观察其中免疫力学信号传导的具体机制。通过本研究不仅可以深入揭示针刺抗炎镇痛的神经-免疫-生物力互作机制，也为免疫力学研究带来新的切入点。

我国免疫学研究蓬勃发展的同时，也面临着学科发展不够平衡、与相关学科的实质性交叉不足等挑战。针刺疗法在临床具有适应症广、疗效显著、应用方便等优势，针灸缓解炎性痛的有效性已经在临床和实验研究得到证实，探析其中枢与外周相关神经化学免疫成分的调节通路显得尤为重要。而穴位局部作为针刺刺激信号的直接激发部位，却少有研究从针刺局部穴位的应答反应机制角度进行深入研究。本研究以佐剂型关节炎模型大鼠为研究对象，通过不同手法针刺炎性区域附近穴位，从行为学、组织化学、激光共聚焦显微成像等方面分别观察模型大鼠痛阈、炎性组织中肥大细胞及相关神经免疫化学成分的表达变化，并在此基础上重点观察其中相关信号传导机制，同时探索其免疫力学始动因素。采用CFA溶液用于诱导大鼠踝关节炎模型，在关节周围组织中注射后2d时大鼠的炎症状态最严重，在未进一步进行药物加强免疫的情况下，其炎症程度最后逐渐得到缓解。针刺干预“解溪”穴可显著提高踝关节炎模型大鼠的机械痛阈和热痛阈，缓解关节局部疼痛以改善大鼠踝关节功能，其中捻转针刺组相较于留针组无显著差异。捻转针刺“解溪”穴可明显减少CFA关节炎模型大鼠关节周围组织中SP和CGRP阳性神经纤维、LAMP标记激活型肥大细胞、5-HT、CD11b及TNF-α；同时捻转针刺组大鼠脊髓背根节和脊髓后角SP和CGRP神经纤维及其终末表达得到抑制，且可抑制脊髓小胶质细胞的活化，从而改善大鼠踝关节炎症状态。研究表明肌动蛋白纤维作为细胞骨架之一能够传递和聚集外力从而激活肥大细胞。细胞骨架和转化生长因子TGF-β广泛分布于组织细胞中，在发挥正常的生物学功能时，部分生物学活动功能与机械力信号呈现一定相关性，可能成为针刺机械力影响细胞结构成分变化的始动因素之一。通过本研究我们期待进一步深化对于力学信号传导和针刺抗炎镇痛局部作用机制的深入了解，并拓展我们对针灸神经-免疫-生物力互作机制机制和其近治作用的认识，从而使免疫学和针灸学基础研究更好地服务于临床的实际需求。