与金葡菌应激和致病正负相关的两种新的小RNA生物学功能研究

同真核细胞相似，细菌中也存在具有调控作用的非编码RNA（sRNA）。金黄色葡萄球菌是一类重要的病原菌，已有报道表明一些sRNA参与了金葡菌的致病过程。我们课题组利用RNA伴侣分子Hfq蛋白钓取并克隆了两条新的金葡菌sRNA－L8和L10，并构建了相应的缺失突变菌株。已有的实验结果表明Hfq蛋白能够影响这两种sRNA在细菌内的水平。初步的应激实验和动物实验表明，L8的水平与金葡菌的应激和致病能力负相关，而L10呈正相关。本课题将在已有的工作基础上，研究L8和L10的自身表达调控，筛选并鉴定其作用的靶基因，详细阐述其对靶基因的调控机制，从而阐明这两种sRNA如何参与金葡菌的应激和致病过程，进而揭示其生物学功能。该课题的开展将推动金葡菌中sRNA的相关研究，同时也会为抗金葡菌感染提供潜在的药物靶标和新的理论基础。

同真核细胞相似，细菌中也存在具有调控作用的非编码RNA（sRNA）。金黄色葡萄球菌是一类重要的病原菌，已有报道表明一些sRNA参与了金葡菌的致病过程。我们课题组利用RNA伴侣分子Hfq蛋白钓取并克隆了两条新的金葡菌sRNA－L8和L10，并构建了相应的缺失突变菌株。已有的实验结果表明Hfq蛋白能够影响这两种sRNA在细菌内的水平。初步的应激实验和动物实验表明，L8的水平与金葡菌的应激和致病能力负相关，而L10呈正相关。本研究中构建L8基因的缺失突变体（Mut）和回复突变体(RM)，利用基因芯片和生物信息学方法，对L8作用的靶基因了预测。进一步通过RT-PCR、构建lacZ报告载体等方法，对靶基因进行了验证，结果显示L8可能下调SAV2109基因的表达。L8稳定性的研究，通过构建Hfq蛋白、RNase III蛋白突变体菌株，利用qRT-PCR的方法，检测L8的表达水平，结果表明Hfq蛋白缺失的菌株中L8的表达水平明显下调，而RNase III缺失的菌株中L8的表达水平明显上调，表明这两种蛋白均参与L8稳定性的调控。本研究将推动金葡菌中sRNA的相关研究，同时也会为抗金葡菌感染提供潜在的药物靶标和新的理论基础。