探讨aKIR对造血干细胞移植后早期CMV激活的调控作用

巨细胞病毒（CMV）是造血干细胞移植后最常见的感染源之一。KIR是NK细胞重要免疫球蛋白受体，配体为HLA-I类抗原。本课题前期研究发现KIR与CMV激活密切相关。预实验表明激活性KIR(aKIR)可能调控移植后CMV早期激活，据此推测移植中供受体存在HLA/KIR受配体缺失模式时，启动aKIR信号传导通路，aKIR活化，NK杀伤病毒作用增强，但aKIR过度活化,抑制性KIR表达增高，反而使CMV易激活。本研究拟收集HLA/KIR受配体缺失病人，采用流式和分子生物学等方法证实体内aKIR及激活性信号分子的活化水平影响CMV激活；同时建立体外受配体缺失模式的NK细胞杀伤CMV模型，在aKIR非过度活化和过度活化组，分别用IL-2激活及单抗阻断激活性信号通路ZAP70磷酸化后,比较NK细胞对CMV杀伤功能的改变，进一步验证aKIR及其信号通路对CMV的调控作用，为临床CMV感染防治提供新思路。

巨细胞病毒（CMV) 是造血干细胞移植后最常见的感染源之一。KIR是NK细胞重要免疫球蛋白受体。激活性KIR与CMV激活存在密切相关性。本课题共收集289对供受体标本，采用序列特异性引物聚合酶链反应（PCR-SSP）基因分型筛选出165例AA单体型的供体，根据2DS4是否存在变异体可进一步分为2DS4+/1D-,2DS4+/1D+,2DS4-/1D+ 三组；三组患者激活性KIR在mRNA和蛋白水平的表达均存在差异，三组患者CMV激活分别为 46.96%, 20.16% 和 53.25%，通过多因素分析2DS4+/1D+是CMV激活的保护因素。进一步通过流式细胞仪检测了不同基因型的NK细胞的颗粒酶B，穿孔素和干扰素的表达，对不基因型的NK细胞的功能进行验证。结果显示由于激活性KIR基因表达的差异导致NK细胞功能的差异。体外试验中我们建立了HLA/KIR错配模式的NK细胞杀伤DC模型，DC细胞来源于病人外周血的单个核细胞。验证了不同状态的NK细胞对DC细胞的杀伤能力。以上实验结果显示激活性KIR基因的表达可能是NK细胞的异源性活化的主要原因之一，对CMV的激活起到重要的调控作用，为临床预测CMV感染的高危病人，选择合理供体提供了实验依据。本课题协助培养二名研究生，其中一名博士，一名硕士。共发表论文8篇，其中SCI论文3篇。