核糖体展示抗体库高通量筛选典型环境内分泌干扰物特异抗体的研究

基于高特异性抗体的环境内分泌干扰物(endocrine disrupting chemicals，EDCs)免疫检测技术是快速检测EDCs、监测环境安全的重要手段，但是，作为小分子半抗原，EDCs的单克隆抗体制备困难、费用高、多克隆抗体特异性较差；本项目旨在利用核糖体展示技术实现快速筛选，利用天然抗体库的通用性实现抗体库的高通量，在鼠源ScFv抗体库中引入核糖体展示的系列元件构建核糖体展示鼠源天然抗体库，以典型EDCs双酚A、雌二醇、壬基酚等不同分子为靶标进行多轮快速淘筛，将抗体在大肠杆菌中进行高效功能表达，以表面等离子共振（SPR）等技术评价并鉴定抗体的性质(包括亲和力效价、结合位点或基团等)，系统研究核糖体展示高通量抗体库的设计与构建、筛选条件优化等，建立EDCs高特异性抗体的高通量快速筛选技术，为快速筛选制备小分子半抗原污染物的高特异性抗体奠定基础。

本项目利用核糖体展示技术实现快速筛选，利用天然抗体库的通用性实现抗体库的高通量，在鼠源ScFv抗体库中引入核糖体展示的系列元件构建核糖体展示鼠源天然抗体库，以典型EDCs己烯雌酚、雌二醇、壬基酚等不同分子为靶标进行多轮快速淘筛，获得了多个针对以上靶标的单链抗体，将抗体在大肠杆菌中进行高效功能表达，以表面等离子共振（SPR）等技术评价并鉴定抗体的性质，抗体亲和力均达到10-6nmol/L，建立了EDCs高特异性抗体的高通量快速筛选技术，为快速筛选制备小分子半抗原污染物的高特异性抗体奠定基础。