调节性B细胞在抗体诱导的移植免疫耐受中的表型鉴定及其作用机制研究

大量研究显示，B细胞在许多自身免疫疾病中具有调节作用，称为调节性B细胞(Bregs)，但Bregs在移植免疫中是否具有调节作用鲜有报道。我们前期研究表明，抗CD45RB抗体诱导的同种异基因小鼠心脏移植免疫耐受需要B细胞，本课题拟进一步研究这些B细胞是否具有免疫调节功能，它们细胞表型有何特点以及可能的调节机制。因此，我们采用上述小鼠心脏异位移植模型，利用继承性细胞转移方法来研究Bregs是否存在，以及B细胞来源的TGF-β1对移植物存活时间影响；观察抗CD45RB抗体单独或联合RMT1-10用药后Tim-1+Ｂ细胞的表达变化，以及Tim-1+ 和Tim-1-Ｂ细胞对移植物存活时间影响，同时探讨Bregs对慢性移植物血管病变、Th1/Th2转化、Tregs增殖以及中和抗体IgG、IgA等的影响，旨在加深对机体免疫调节机制的认识，以期为免疫耐受的诱导以及自身免疫疾病的治疗提供新的思维和治疗策略。

既往对调节性B细胞（Breg）的研究多局限在对多种自身免疫疾病炎症反应的免疫调节，而对Breg在移植免疫应答过程中的作用了解甚少，因此，有关Breg在移植免疫耐受的研究也逐渐成为了热点。本项目研究了在抗CD45RB抗体或（和）抗Tim-1抗体诱导的移植免疫耐受中Breg的调节作用、Breg来源的TGF-beta的作用；Breg和Treg的相互依赖关系；B细胞和Treg在抗体诱导的异种胰岛移植免疫耐受中的作用以及抗体诱导生物工程预血管化的小室内移植异种胰岛长期存活的能力。研究结果显示，抗体诱导的移植免疫耐受确实需要TGF-β细胞因子参与，而且进一步证实这种具有免疫调节功能的TGF-β可能来源于Breg。继承性转移长期耐受小鼠Bregs可使Tregs数量显著增加，并且可诱导CD4+Foxp- T细胞表达Foxp3；用抗-CD20抗体祛除B细胞后Tregs数量明显减少，说明Breg其调节机制可能通过TGF-β，诱导具有免疫抑制功能的Treg形成而发挥移植免疫调节功能。抗体诱导的异种胰岛移植免疫耐受的研究显示，去除B细胞能促进移植物的长期存活，而且这种免疫耐受是种系特异性的，可能与移植早期产生的抗原特异性的Treg有关。该研究结果具有重大意义：①首次发现Breg来源的TGF-β在器官移植或组织移植免疫耐受中扮演重要的调节作用；②首次发现具有分泌TGF-β功能的Breg对Treg增殖及功能的影响；③首次报道抗CD45RB抗体能诱导异种胰岛移植免疫耐受，但Treg的功能并与B细胞非相关。本项目有助于我们加深对Breg在器官移植免疫耐受中作用机制的理解，帮助我们为免疫耐受的诱导以及自身免疫疾病的治疗提供新的思维和治疗策略。