糖原合成酶激酶3β的microRNA预测、验证及在阿尔茨海默病中的调控作用分析

阿尔茨海默病（AD）是老年人常见的神经退行性疾病，糖原合成酶激酶3β（GSK3β）在AD病理过程中起重要作用。GSK3β在AD病人脑内表达上调，其原因尚不清楚。研究表明microRNA(miRNA)参与AD病理过程的调控，是否有miRNA调控GSK3β表达未见报道。根据文献及该基因的特点，我们推测其表达受miRNA调控,这已得到我们预实验结果的支持。本课题拟采用生物信息学方法预测GSK3β的miRNA,用分子生物学方法进行实验验证；在细胞水平上深入分析验证的miRNA在Tau蛋白磷酸化、Aβ水平及Aβ对Tau磷酸化的促进作用等AD相关信号中的调控作用，并在AD动物模型中检测GSK3β和验证的miRNA表达情况，探讨miRNA在AD病理过程中的作用。本研究有望从转录后水平阐明GSK3β表达的调控机制与AD病变发生过程的关系，为彻底阐明AD的发病机制提供理论依据，为开发AD新药提供新思路。

近期发现microRNAs(miRNAs)在阿尔茨海默病（Alzheimer’s disease, AD）神经退行性病变过程中起重要作用，但参与调控的特异性miRNA 及其调控机制均有待进一步阐明。我们针对与AD病理过程密切相关的蛋白GSK3β，预测调控其表达的miRNA，进而用荧光素酶报告基因及western bloting的方法对预测结果进行验证，确认miR-26b和miR-128a能与GSK3β的3‘UTR结合，抑制其翻译。并进一步在细胞水平过表达或抑制miR-26b和miR-128a，发现能抑制Aβ的生成，降低tau磷酸化的水平。在三转基因AD小鼠模型中，miR-26b和miR-128a的表达随年龄增长而下调，同时GSK3β蛋白水平呈现上调趋势。这些结果表明，miR-26b和miR-128a能调控GSK3β表达，这种调控作用在AD病理过程中起重要作用，为探讨miRNAs 对神经退行性病变调控的机制及开发有效的治疗药物靶标提供了一定的实验依据。