TGF-beta调控肝癌微环境中CD4+辅助性T淋巴细胞亚群功能的研究

免疫微环境及CD4+辅助性T淋巴细胞是近年肿瘤学及免疫学研究的热点。大量研究表明微环境中不同类型Th细胞浸润对肿瘤预后具有不同的影响。然而，在作为有机整体的宿主体内，各Th细胞是"单兵作战"还是协同合作，哪种Th细胞对肿瘤预后影响最大尚不清楚。TGF-β是多功能的免疫抑制性细胞因子，不仅通过参与肝癌发生发展的各个环节而促进肿瘤进展，也是调控微环境中多种Th细胞亚型分化和功能的决定性因子。本课题通过建立DEN（二乙基亚硝胺）诱导的大鼠肝癌模型结合TGF-β信号通路阻断药物（SM-16），系统地研究TGF-β对于肝癌免疫微环境中Th细胞亚群功能及其"交叉对话"的调控，试图系统地描绘出一张关于肝癌免疫微环境的全景图。并且应用临床标本进行验证，建立Th细胞相关的肝癌分子分型体系预测复发转移。遴选出对肝癌复发影响最大的Th细胞类型，并基于该细胞探索过继转移免疫疗法，实现肝癌的个体化治疗。

研究背景：肝癌是世界上最常见的恶性肿瘤之一，其发病率位居第三，每年死亡的病例数超过50 万。因其恶性程度高，预后差，素有癌中之王的称号。前期对于肝癌的研究重点主要集中于基因突变方面，比如原癌基因的激活或抑癌基因的失活等，但由于肝癌的异质性，目前这方面的研究不如人意。研究发现，免疫微环境在HCC的发生发展过程中同样发挥着重要作用，相关肿瘤浸润免疫细胞如Treg细胞、巨噬细胞、中性粒细胞和Th17细胞等在肝癌的发生发展中具有重要的重用，可通过分泌相关炎性因子作用于肿瘤细胞起促进或抑制作用。Treg细胞对维持免疫微环境的稳定具有重要作用，并参与外周免疫耐受的维持以及防止自身免疫反应的发生。而TGF-β主要是由活化的巨噬细胞分泌，一些受损伤的肝细胞也能分泌少量的TGF-β，可通过作用于TGF-β受体后激活下游的smad2/3，促进smad2/3的入核，进而在肝癌的发生发展中起着重要的作用。. 研究内容：研究健康小鼠组、DEN小鼠组以及DEN+SM-16小鼠组中HCC的发展过程、TGF-β以及Foxp3表达水平、血清中TGF-β的水平、血清中IL-10的水平、血清中GP73的水平和Treg细胞的比例。在体外通过流式细胞检测实验分析TGF-β在Treg细胞极化过程中的作用。通过免疫组化的方式鉴定HCC患者肿瘤样本中TGF-β以及IL-10的表达水平，并分析两者的相关性。. 研究结果及意义：本项研究证实SM-16对小鼠DEN诱导肝癌模型中的TGF-β具有抑制作用，可在核酸及蛋白水平下调TGF-β的表达，并能抑制小鼠血清中TGF-β的分泌。同时也证实了SM-16可以抑制肝癌的进展及恶性程度。相关检测发现SM-16可以降低Treg细胞的比例。临床相关研究证实肝癌组织中TGF-β与IL10呈相关性。综上所述，TGF-β可以通过诱导Treg细胞的极化而促进肝癌的进展。此研究表明，TGF-β在HCC中高表达且通过诱导Treg细胞的极化进而在HCC的发展过程中发挥重要作用。并通过SM-16抑制TGF-β的表达可有效减缓HCC的发展，其可能成为HCC患者的潜在治疗靶点。