CMV 2b蛋白致病关键氨基酸在RNA沉默通路中的作用方式和靶位

黄瓜花叶病毒（CMV）是目前危害最为严重的植物病毒之一，被作为RNA病毒的模式病毒进行研究。本项目在前期工作已经找到CMV 2b蛋白致病关键氨基酸（Leu55）和发现Leu55在CMV 2b蛋白第55位具有普遍性的基础上，以预实验发现Leu55与抑制GFP转基因诱导的转录后基因沉默（PTGS）有关作为突破口，以GFP转基因的本生烟16c作为研究对象，克隆本生烟体内PTGS通路相关的蛋白因子，分析其受Leu55的调控；利用酵母双杂交、农杆菌共浸润瞬时表达结合免疫共沉淀技术分析编码Leu55的2b蛋白与PTGS通路相关因子的互作和与siRNA的结合情况，明确2b蛋白致病关键氨基酸（Leu55）在PTGS通路中的作用方式和靶位。本研究的开展将为抑制子干扰PTGS通路研究提供了一套较完整的本生烟遗传信息；有望解析CMV致病的分子机理，为发展防治CMV的新策略和新思路提供理论依据。