脊髓损伤后ES介导下5-HT受体重塑规律的研究

脊髓损伤后硬膜外脊髓电刺激介导下5-羟色胺受体重塑规律的研究，有助于明确硬膜外脊髓电刺激改善下肢功能的机制，为临床应用提供理论依据。应用大鼠脊髓横切模型及背根切除模型，对损伤下位的腰骶髓予以硬膜外脊髓电刺激后，筛查脊髓下肢屈、伸肌群神经核团内，5-羟色胺受体亚型mRNAs的表达类型。观察硬膜外脊髓电刺激介导下，5-羟色胺受体重塑在脊髓内的分布，及其与下肢屈、伸肌群运动神经元的联系。探索本体感觉传入在硬膜外脊髓电刺激介导的5-羟色胺受体重塑中的角色。5-羟色胺各受体类型表达的筛查结果，将为硬膜外脊髓电刺激的作用机制研究，提供更明确的方向；为进一步体外研究脊髓5-羟色胺受体表达与下肢功能的关系提供平台。本体感觉传入在硬膜外脊髓电刺激介导的5-羟色胺受体重塑中角色的研究，将进一步明确脊髓电刺激的作用通路，并为临床应用硬膜外脊髓电刺激提供理论依据。

背景：脊髓硬膜外电刺激(epidual spinal cord stimulation, ES，ESCS)是近年来研究脊髓下肢步行中枢机制的新手段，也是临床促进脊髓损伤患者步行功能恢复的新方法；既往研究表明，其对步行运动的调控，可能是由脊髓内5-HT受体依赖的神经传导通路介导的，且下肢的感觉传入可能参与了此过程。.方向：通过对大鼠脊髓损伤后，ES介导下5-羟色胺受体重塑规律的研究，探索ES改善下肢功能的机制。.主要内容：应用大鼠脊髓横切模型及背根切除模型，对损伤下位的腰骶髓予以ES后，通过RT-PCR技术、神经示踪技术和形态组织学技术等，观察ES介导下，5-羟色胺受体重塑在脊髓内的分布，及其与下肢屈、伸肌群运动神经元的联系。.重要结果：在正常对照组、脊髓损伤对照组、脊髓损伤+ES+Quipazine+跑台组、脊髓损伤+跑台组、脊髓损伤+ES+跑台组、脊髓损伤+背根切除+ES+Quipazine+跑台组、脊髓损伤+背根切除+ES+跑台组，大鼠脊髓下肢屈肌群神经核团及伸肌群神经核团内均检测到了5-HT1A、5-HTlB、5-HT1D、5-HT1F、5-HT2A、5-HT2B、5-HT2C、5-HT3A、5-HT4、5-HT5A、5-HT7各受亚型mRNAs的表达。而各组5-HT3B的mRNAs表达量偏低，实验重复性不好。各组均未检测到5-HTlE、5-HT5B、5-HT6 mRNAs的表达。通过荧光金逆行神经示踪技术发现，正常对照组、ES组、跑台组大鼠支配胫前肌与比目鱼肌的脊髓运动神经元都有荧光金逆行标记。超微透射电镜在各实验组大鼠脊髓下肢屈肌群神经核团及伸肌群神经核团内均未发现神经元结构，但可见无髓纤维所形成的突触结构。小清蛋白+5HT2A受体荧光双标显示，在脊髓损伤+跑台组、脊髓损伤+ES+跑台组脊髓组、脊髓损伤+背根切除+ES+Quipazine+跑台组脊髓内下肢屈肌运动神经元核团，脊髓损伤+背根切除+ES+跑台组脊髓内下肢伸肌运动神经元核团，存在小清蛋白和5HT2A受体的部分共表达。.关键数据及其科学意义：与运动功能密切相关的5-HT2A受体在相关实验组脊髓内下肢屈肌运动神经元核团内的表达较正常对照组和脊髓损伤对照组降低。提示ES与Quipazine可协同降低脊髓损伤后5-HT2A受体的表达量，促进步行功能恢复。