早老综合症所致ALT肿瘤的特有p53突变-p53S与Ras协同的分子基础

早老综合症（WS）所致ALT肿瘤的机理尚不清楚，因其是衰老直接诱导产生的肿瘤，其研究对于了解衰老与肿瘤的相关性，从而人工干预衰老与肿瘤有重要意义。我们在WS早衰细胞逃逸衰老导致的ALT肿瘤中，发现了一个研究很少的p53突变p53N-S与ALT肿瘤发生直接相关，同时，在多种肿瘤病例中也发现了该突变。在自然基金资助下，我们研究发现，该突变蛋白p53S不仅丧失了野生型的功能，其与Ras协同作用可迅速诱发巨大肿瘤。同时，我们建立了p53S敲入小鼠模型。该小鼠出现多器官转移性淋巴瘤等表型，表明p53S获得了癌基因的新功能。基于此，本项目将利用p53S小鼠与突变Ras小鼠模型，在分子、细胞、动物整体水平研究p53S与Ras协同效应的分子基础及其在肿瘤发生、转移中的作用。同时，这一体系可研究p53S与野生型p53的相互作用，进一步探索p53S的获得性新功能，对于阐明衰老导致肿瘤的分子路径有重要意义。

早老综合症（WS）所致ALT 肿瘤的机理的研究对于了解衰老与肿瘤的相关性有重要意义。p53S是在ALT 肿瘤中发现的一个p53点突变，我们利用p53S 敲入小鼠模型与突变Ras 小鼠模型，研究p53S 与Ras 协同效应的分子基础及其在肿瘤发生、转移中的作用。在细胞与分子水平上，我们发现p53S与Ras协同可以降低衰老和热休克家族相关蛋白的应激水平，这可能使K-Ras p53S/S细胞对各种压力应激不敏感，进而增加细胞癌变的可能。在小鼠水平上，我们也看到了相同的现象。我们对K-RasLSL G12D/+p53S/S小鼠进行鼻腔滴注AD-Cre病毒悬液成功诱发小鼠肺部的局部Kras表达，建立了K-RasG12D/+p53S/S小鼠模型。通过对小鼠的肺部组织进行Western blot，免疫组化以及HE染色等分析，我们发现在K-RasG12D/+p53S/S小鼠肺部组织中，损伤应激和细胞凋亡相关蛋白都被明显下调，提示p53S与癌基因Ras相互作用，可以部分削弱由Ras过表达所引起的损伤应激和细胞凋亡，从而有利于细胞生长和肿瘤形成。此外我们通过对ChIP-chip和Microarray数据的解析，初步探索了p53S对Ras通路转录调控的机制。p53S 的获得性新功能的进一步探索，对于阐明衰老导致肿瘤的分子路径有重要意义。