IgA肾病治疗新靶点——补体C3a、C5a受体缺失延缓IgA肾病进展

IgA肾病是我国最常见的原发性肾小球病，也是我国尿毒症的首位病因，目前发病机制仍不清楚。以往研究聚焦在IgA分子结构异常，认为IgA分子异常糖基化与IgA肾病发生关系密切，糖基化酶基因多态性与IgA肾病家族聚集现象有关。然而，流行病学研究显示仅不到10％IgA肾病患者有家族聚集性，且肝硬化患者由于IgA分子清除障碍所继发IgA肾病并不存在IgA分子异常，因此IgA分子异常并非是IgA肾病唯一发病机制。C3a、C5a是补体级联活化产生的最主要致炎症产物，是否参与IgA肾病的发生和发展，国内外报道极少。本研究利用IgA肾病患者肾组织、C3aR/C5aR单双基因敲除小鼠IgA肾病模型及分离系膜细胞进行体内、外实验，用免疫组化、流式细胞仪、RT-qPCR、Western blot及ELISA等技术，从不同层面阐明C3a、C5a在IgA肾病发病机制中的作用，为寻找IgA肾病治疗新靶点奠定理论基础。

项目背景：IgA肾病是我国最常见的原发性肾小球病，也是我国尿毒症的首位病因。以往对IgA肾病发病机制的研究聚焦在IgA1分子的异常糖基化。然而，IgA肾病患者的亲属中40%-50%同样具有高水平的糖基化异常IgA1分子却并不发病，提示IgA1分子糖基化异常并非IgA肾病唯一发病机制。IgA肾病在系膜区除了IgA沉积，常伴有C3沉积。补体激活在IgA肾病发病机制中发挥重要作用。C3a、C5a是补体活化最主要的致炎症产物，是否参与IgA肾病的发生和发展，国内外报道极少。主要研究内容：本研究利用IgA肾病患者肾组织、C3aR/C5aR基因敲除小鼠IgA肾病模型及人系膜细胞进行体内、外实验，用免疫组化、Western blot、ELISA及RT-qPCR等技术，从不同层面阐明C3a、C5a在IgA肾病发病机制中的作用，为寻找IgA肾病治疗新靶点奠定理论基础。研究结果：IgA肾病患者肾组织C3a、C5a沉积及C3aR、C5aR表达与蛋白尿及血肌酐正相关，并随病理分级升高而增多。IgA肾病患者较健康人血清C3a、C5a水平显著升高（P<0.001），但不同病理损伤程度IgA肾病患者间无差别（P>0.05）；尿液C3a、C5a水平也显著升高（P<0.001），且与病理损伤程度呈正比（P<0.05）。利用仙台病毒免疫建立IgA肾病小鼠模型，C3aR及C5aR基因敲除小鼠较野生型小鼠蛋白尿显著减少（P<0.05），肾组织IgA及C3免疫荧光减弱，肾脏病理系膜细胞增生减轻。C3aR及C5aR基因敲除都明显抑制了单核/巨噬细胞浸润及炎症趋化因子TNF-α、TGF-β、IL-1β、IL-6和MCP-1表达，C3aR敲除较C5aR敲除IL-1β、IL-6、MCP-1的mRNA表达更低（P<0.05）。但C3aR、C5aR基因敲除IgA肾病小鼠与野生型IgA肾病小鼠肾功能无显著差异（P>0.05）。在培养的人系膜细胞，C3aR、C5aR拮抗剂抑制了IgA刺激引起的细胞增殖与IL-6、MCP-1表达（P<0.05）。科学意义：本项目首次在大样本IgA肾病患者上证明了C3a、C5a及其受体与IgA肾病病情活动的相关性，进一步发现C3a、C5a及其受体在IgA肾病发病中的重要作用及其机制，在国内外首次探讨了C3aR、C5aR敲除/拮抗对IgA肾病的保护作用，为寻找IgA肾病治疗的新靶点开辟了新思路。