何首乌活性成份二苯乙烯苷对波形蛋白骨架系统的调控及在防治动脉粥样硬化中的作用

2,3,5,4′-Tetrahydroxystilbene-2-O-β-D-glucoside (TSG) is an active component extracted from Polygonum multiflorum, which has been shown to inhibit the atherosclerotic process through many kinds of targets. We have recently discovered that TSG regulated the expression and cleavage of vimentin in atherosclerotic rats by methods of two-dimensional electrophoresis and MALDI-TOF-TOF. In this study, Western Blotting, Northern Blotting, reverse transcription PCR, immunofluorescence and siRNA technology will be employed in different cells (including endothelial injury model, proliferation and migration model of VSMC, macrophage-derived foam cell model), to confirm the following hypothesis: TSG regulates the vimentin cytoskeleton (including vimentin expression, cleavage and interaction with other adhesion molecules) to inhibit cell adhesion, migration, apoptosis and foam formation. The study will clarify the mechanism of TSG in treatment of AS and provide the basis for vimentin using as a novel TSG target.

何首乌主要活性成份二苯乙烯苷（TSG）已被证实可通过调节多种靶分子起到抗动脉粥样硬化（AS）的作用。近期通过2-DE和MALDI-TOF-TOF等方法在AS大鼠主动脉组织中发现TSG对波形蛋白的表达及裂解具有调控作用。本研究在此基础上，从不同细胞水平（EC损伤凋亡模型﹑VSMC增殖迁移模型﹑巨噬源性泡沫细胞模型），通过Western Blotting﹑Northern Blotting﹑RT-PCR﹑免疫荧光﹑siRNA等方法，证实假设：TSG通过对波形蛋白的调控（包括波形蛋白的表达、裂解及与其它黏附分子的相互作用），起到抑制细胞黏附﹑迁移﹑凋亡及泡沫细胞形成的作用，以阐明TSG抗AS的作用机制，同时为波形蛋白作为新的TSG作用靶分子提供依据。

何首乌主要活性成份二苯乙烯苷（TSG）已被证实可通过调节多种靶分子起到抗动脉粥样硬化（AS）的作用。近期通过 2-DE 和 MALDI-TOF-TOF 等方法在 AS 大鼠主动脉组织中发现 TSG 对波形蛋白的表达及裂解具有调控作用。波形蛋白是中间纤维家族中的一种重要成员，与微管、微丝共同构成细胞骨架系统。研究表明，波形蛋白可促进多种细胞的黏附、迁移，包括肿瘤细胞、内皮细胞、单核细胞等，这种作用可能通过调节其它黏附相关分子来实现。波形蛋白表达还可促进单核/巨噬细胞分化。本研究在此基础上，在不同细胞水平（EC 损伤凋亡模型﹑VSMC 增殖迁移模型﹑巨噬源性泡沫细胞模型），通过 Western Blotting﹑Northern Blotting﹑RT-PCR﹑免疫荧光﹑siRNA 等方法，证实TSG 通过对波形蛋白的调控（包括波形蛋白的表达、裂解及与其它黏附分子的相互作用）起到抗AS的作用。重要结果如下：.（1）TSG分别通过TGF-β/Smad信号通路和Caspase3活化调控Vimentin表达及裂解，从而有效改善TNF-α或ox-LDL诱导的内皮细胞损伤、凋亡；(2) TSG通过抑制ICAM-1和VCAM-1表达以及它们与Vimentin的共定位，抑制内皮细胞与单核细胞的黏附；(3) TSG通过抑制Vimentin表达和骨架形态，抑制TNF-α诱导的VSMCs迁移和ox-LDL诱导的泡沫细胞形成及巨噬细胞凋亡；（4）TSG抑制ox-LDL诱导的单核细胞中ICAM-1表达及其与Vimentin的共定位。该研究为波形蛋白作为新的TSG作用靶分子提供依据，也为TSG的临床应用及抗AS创新药物研发奠定基础。