调节性B细胞对甲状腺相关眼病免疫调节作用的机制研究

TAO (Thyroid associated ophthalmopathy) is the leading course of orbital diseases in adults, capable to damage the patients’appearance and visual acuity. The exact pathogenesis of TAO appears to involve complex molecular and cellular process, and B cells play a critical role in this process. A discrete subset of B cells, has been shown to limit autoreactive and pathogen-driven immune pathology while releasing of interleukin-10 (IL-10). Our previous study indicated that significantly lower proportions of Bregs in patients with TAO than in healthy donors. Furthermore, we found that thyrotropin significantly induced Bregs (regulatory B cells) to produce anti-inflammatory cytokines, such as IL-10, by binding its receptors. Thus, we speculate the pathogenesis of TAO appears to involve immune down-regulatory effect of Bregs, and its immunosuppressive function may control by TSHR signaling pathway. To further investigate the hypothesis, we propose to study the proportion and phenotypic differences of Bregs and analysis the relationship with clinical activity of TAO. Besides, to address the question, we evaluated whether Bregs isolated from patients with TAO can control the release of proinflammatory cytokines produced by CD4+T cells. Finally, we will investigate the regulation of TSHR signaling pathway. The findings of our study will provide new insight for pathogenesis and immunological treatment of TAO.

甲状腺相关眼病（TAO）是最常见的成人眼眶病，严重影响患者容貌和视功能。其发病涉及多种免疫细胞，其中B细胞在TAO的发展中起关键作用。B细胞中有一类调节性B细胞（regulatory B cells，Bregs），能够通过分泌白介素-10（IL-10）发挥负向免疫调节作用。我们的前期研究表明，TAO患者的Bregs比例明显降低，促甲状腺激素与其受体TSHR结合能够显著诱导活化的Bregs分泌IL-10。我们推测Bregs免疫下调作用参与TAO的发生发展，并可能受到TSHR信号通路的调控。本课题将研究TAO中Bregs频率分布和表型差异及其与临床活动性的关系；研究Bregs对T细胞增殖、凋亡、表达炎症因子的影响，探讨其作用机制；研究TSHR信号通路是如何调控Bregs发挥负向免疫调节作用的。本课题对进一步阐明TAO的发病机制具有重要意义，并为TAO的治疗策略提供新视角。

甲状腺相关眼病（Thyroid associated ophthalmopathy，TAO）又称Graves眼病，是一种累及眼眶的自身免疫性疾病。TAO的发病机制尚不完全清楚，遗传、环境及免疫因素均被认为在TAO的发生发展过程中发挥了作用。其中在免疫因素中，大量研究认为T淋巴细胞、B淋巴细胞以及单核细胞等均可能参与了TAO的发病。以往的证据表明B细胞在自身免疫性疾病中发挥了其负向免疫调节功能，然后近些年来的研究表明B细胞的某一个亚群在自身免疫性疾病中发挥了正向免疫调控功能，这个亚群被命名为“调节性B细胞”。甲状腺刺激素受体（Thyroid-stimulating hormone receptor，TSHR）是TAO的重要自身抗原，实验室研究表明，虽然TSHR在正常对照组和TAO患者的眼眶成纤维细胞和组织中都有表达，但是与正常对照组相比，在TAO患者中存在着显著的更高水平的表达。此外，来自活动期TAO患者的眼眶脂肪组织比静止期TAO患者的眼眶脂肪组织表达更高水平的TSHR。本研究检测了活动期、静止期TAO患者、Graves并患者以及健康成年人外周血中B10细胞及其富集细胞群的数量和功能，分析该细胞在TAO发生发展中的作用。同时研究TSHR信号通路是如何调控Bregs产生IL-10进而在疾病的不同阶段发挥免疫调控作用的。研究发现，活动期TAO患者及Graves病患者Bregs的频率高于正常人，静止期TAO患者Bregs频率与正常人相比无统计学差异。活动期TAO患者及Graves病患者的Bregs的诱导效率低于正常人，静止期TAO患者的Bregs的诱导效率与正常人相比无统计学差异。Bregs频率与TAO疾病活动性呈正相关，与TAO病程无关；TSH促进IL-10的产生，活动期TAO患者的Bregs的诱导效率明显低于健康对照组和静止期TAO患者。TSH促进IL-10产生受PI(3)K/Akt/NF-κB信号通路的调控；在正常人中，Bregs细胞具有显著的免疫抑制功能，而在TAO患者中，Bregs细胞的这种免疫抑制功能是缺失的。本研究对进一步阐明TAO的病理机制具有重要的意义，并为TAO的治疗策略提供新的视角。