髓样分化蛋白2抑制剂L6H21缓解AngII诱导的炎症和慢性肾病的作用和机制研究

Angiotensin II (Ang II) plays a vital role in the development of chronic kidney disease (CKD). In addition to the effect of hemodynamic, inflammation induced by Ang II is a major pathological process in CKD, the underlying mechanism of Ang II induced nephritis however is not well understood. Myeloid differentiation 2 (MD2) plays an important role in TLR4 induced innate immune. Although previous reports pointed out that TLR4 plays vital role in CKD, but the mechanism and whether MD2 participates the process remains unclear. Ang II induced kidney inflammation and fibrosis can be significantly inhibited by MD2 inhibitor L6H21 in vitro and in vivo. We will illustrate the molecular mechanism of L6H21 attenuated CKD and the mechanism of Ang II directly bind to MD2 to activate inflammation in the levels of cellular, molecular and animal by using MD2 small molecular compound L6H21, MD2 silence technology and MD2 knockout mice. This project will provide foundation for discovering new targets and drugs in the treatment of CKD.

血管紧张素II（AngII）在慢性肾病（CKD）发生发展中起重要介导作用。除血流动力学影响外，AngII介导的炎症反应也是CKD的重要病理过程，但是AngII诱导肾脏炎症发生的机制尚不明确。髓样分化蛋白2（MD2）是TLR4天然免疫中的重要介导蛋白。虽然已发现TLR4在AngII诱导CKD过程中起重要作用，但其机制以及MD2是否参与这个过程尚不清楚。我们前期发现，MD2小分子抑制剂L6H21在体内外均显著抑制AngII诱导的肾炎症反应和纤维化，提示MD2可能介导AngII诱导的CKD发展。本项目拟进一步阐明L6H21缓解CKD的分子机制，并以L6H21作为工具化合物，结合MD2沉默和基因敲除等手段，在细胞、分子和动物三个层面，阐明AngII直接结合MD2激活肾炎症反应的机制，明确MD2介导AngII诱导CKD的作用和机制。本项目的实施将为CKD防治新药物和新靶点的发现奠定基础。

血管紧张素II（AngII）在慢性肾病（CKD）发生发展中起重要介导作用。除血流动力学影响外，AngII 能够通过其非血流动力学作用诱导肾脏炎症促进慢性肾脏病的发生发展，但是，AngII诱导肾组织炎症发生的机制尚不完全清楚。因此，深入阐明AngII诱导肾组织炎症的分子机制，寻找这个过程中重要的分子靶点，为 CKD 的治疗提供新的靶点和策略具有重要的临床意义。髓样分化蛋白2（MD2）是TLR4天然免疫中的重要介导蛋白。虽然已发现TLR4在AngII诱导CKD过程中起重要作用，但其机制以及MD2是否参与这个过程尚不清楚。在本项课题研究中，我们通过SPR, ELISA, co-IP, WB等多种实验手段确证了MD2调控AngII诱导CKD的病理机制。在分子层面，我们发现MD2能够与AngII发生直接的结合作用；为了进一步探究这种结合是否具有生理意义，我们在细胞层面上进行了系列实验，发现这一结合促进了MD2/TLR4复合体的形成，进而激活TLR4炎症信号通路；在动物层面上利用了MD2基因敲除小鼠，来确证MD2蛋白调控下游炎症信号通路的作用。基于以上的机制研究，我们课题组研发的MD2小分子抑制剂L6H21在体内外实验中均能发挥出色的药理活性，显著缓解了AngII诱导的肾炎症反应和纤维化，为 CKD 的治疗提供了新的策略和候选药物，具有重要的科学意义和临床价值，达成了预期申请书中的目标。基于其它的临床病理模型，我们还拓展研究了MD2小分子抑制剂L6H21对于肥胖诱导的心脏损伤、肾脏损伤和肝脏组织损伤的药理药效。除了完成项目申请书中的研究内容外，在我们的实际研究过程中还发现我组另一种MD2小分子抑制剂L6H9在糖尿病肾病中的优秀抗炎药理活性，确证MD2蛋白在糖尿病糖肾病中的调控作用。最后，本项目的实施，为我们课题组未来进一步研究小分子抑制剂的临床转化打下了坚实的基础。