静脉全麻药分子作用机制的神经电生理学研究

采用细胞急性分离方法分别分离海马、皮质和下丘神经元，采用全细胞膜片钳技术分别记录不同浓度静脉全麻药（异丙酚、咪唑安定、氯胺酮、依托咪酯）对海马、皮质、下丘神经元电压门控性钙通道(N?L?P?Q?R?T型)的影响，并研究其对通道动力学的作用。同时，把分子生物学技术与膜片钳技术相结合，从Wistar大鼠大脑皮层提取总的RNA，采用RT-PCR 法扩增TREK-1基因，使目的基因片断TREK-1与质粒pcDNA3.0结合并稳定转染到中国仓鼠细胞（CHO细胞）进行表达，使CHO细胞膜大量表达TREK-1通道，然后采用全细胞膜片钳技术记录静脉全麻药对该通道的作用。该项目为最终阐明静脉全麻药作用的神经生理学发生机制提供可靠的实验基础和理论依据，对于找到新的静脉全麻药作用靶点，对于最终解释静脉全麻药的作用机制无疑有着非常重要的意义。同时对于临床合理有效安全地进行麻醉具有重要的现实意义。