青龙衣抗肿瘤有效成分促进细胞膜带3蛋白诱导肿瘤细胞凋亡的分子机制研究

青龙衣为民间治疗肿瘤的常用中药，本研究前期研究发现其抗肿瘤的活性成分为胡桃醌类成分，本课题对其是否具有通过作用于带3蛋白而诱导肿瘤细胞凋亡的机制进行研究。研究方案拟选用Hela细胞为对象，考察青龙衣中胡桃醌在体外对细胞膜带3蛋白活性和含量的影响；进而采用Northern印迹分析法、Western印记分析法、激光共聚焦显微镜技术、流式细胞分析法等方法和技术对青龙衣中胡桃醌体外诱导人癌细胞凋亡的影响进行研究，并对肿瘤细胞凋亡相关基因（P16、P21、P53）表达以及细胞内Ca2+浓度等指标进行研究，探讨其促进凋亡的分子机制；最终，以转染带3蛋白膜段结构域的K562细胞为模型，研究青龙衣中胡桃醌是否可以通过作用于带3蛋白而促进癌细胞凋亡进行深入研究。其结果不仅可以更为全面地揭示青龙衣诱导肿瘤细胞凋亡的分子机理；对验证带3蛋白作为抗肿瘤药物新靶点促进癌细胞凋亡作用的机理也具有重要理论意义。