利用单片段代换系图位克隆水稻粒宽新基因Gw-8

水稻粒形性状是衡量稻米外观品质的重要指标之一。本项目组利用单片段代换系（SSSL）鉴定出一个控制水稻粒宽的新基因Gw-8，并将其界定在20.2kb的物理区域内，鉴定出3个开放阅读框（ORF）。本研究根据候选ORF设计引物，采用TILLING和RT-PCR技术确定目标ORF，利用Northern Blot和RT-PCR技术进行表达差异分析，明确目的基因的表达时期及表达部位；利用LA-PCR技术扩增目标区段，通过测序比对，获得目的基因的全长DNA序列，并分析Gw-8基因在不同物种间的同源基因及功能信息；采用农杆菌介导转化法进行转基因功能互补试验和采用RNAi干涉技术对目的基因进行功能验证；筛选携带Gw-8区段而供体来源不同的SSSL进行基因效应分析并从分子水平上鉴定其等位变异。水稻粒宽基因Gw-8的克隆及等位基因鉴定将有助于从分子水平上进一步阐明水稻粒形遗传基础，为稻米品质分子育种奠定基础。