促微管聚集蛋白3（TPPP3）在肺癌生长和转移中调控作用研究

微管蛋白在肿瘤细胞的增殖与转移中发挥着非常重要的作用。促微管聚集蛋白3（TPPP3）是新近发现的微管相互作用蛋白（MAP），其可通过与微管蛋白作用而影响细胞增殖。我们的前期研究发现TPPP3在肺癌细胞株中高表达。其能促进微管蛋白组装成纺锤体，促进有丝分裂的进行。用RNAi基因干扰技术抑制TPPP3表达后细胞的增殖受到阻滞，细胞的迁移能力降低。以上结果我们已经发表在Mol Cell Bioche杂志上。在此工作基础上，本课题拟进一步以体外培养细胞系和小鼠种植瘤为研究对象，深入探索TPPP3通过乙酰化/脱乙酰基修饰作用于微管蛋白，调控微管蛋白的功能，从而影响细胞有丝分裂和细胞迁移。初步阐明TPPP3在肺癌的生长和转移中的调控机制。研究微管解聚类药物与TPPP3的对抗作用。本研究最后着重探索肺癌病人肿瘤组织中TPPP3的表达谱分布，为探索TPPP3为肺癌标志蛋白提供依据。

促微管聚集蛋白3（TPPP3）是个微管相互作用蛋白，但对其的作用及机制的研究甚微。微管的聚合和解聚在细胞有丝分裂中起着重要的作用。因此本课题组着力研究TPPP3在细胞增殖和有丝分裂中的作用。我们的前期研究结果显示TPPP3能促进HeLa细胞的有丝分裂，促进细胞增殖。因此我们进一步深入研究TPPP3作用机制。.我们选用了高表达TPPP3蛋白的人非小细胞肺癌细胞株H1299作为主要研究细胞株。并利用hTPPP3基因RNAi慢病毒构建了稳定抑制TPPP3蛋白表达的H1299肺癌细胞株。增殖曲线分析和Transwell实验证实：抑制TPPP3蛋白表达的H1299细胞的增殖和侵袭能力都降低。细胞周期分析显示抑制TPPP3表达后细胞周期出现G0/G1期阻滞。此外我们又进行了裸鼠皮下成瘤实验，亦证实TPPP3蛋白表达受到抑制后肿瘤细胞的成瘤能力明显下降。我们进一步研究其中的参与机制。发现抑制TPPP3表达后能下调增殖相关蛋白Stat3和Akt的磷酸化水平以及下调抗凋亡相关蛋白Bcl-2和Survivin的表达，从而使细胞凋亡增加，增殖受到阻滞。此外，我们也研究了TPPP3在人肺癌中的表达分布和其对病人预后的影响。通过进行了人肺癌组织和癌旁组织的组织芯片分析，发现TPPP3的表达水平是影响肺癌患者总体生存期的独立危险因素。肺癌组织中TPPP3表达量高的患者比TPPP3表达量低的患者术后生存期明显降低，该发现为进一步研究该蛋白作为肺癌的重要危险因素提供了重要的线索和依据。.在本基金资助下，发表了SCI论文3篇。由于本课题部分数据刚完成，另有一篇论文在撰写中。同时该课题支持了一名博士研究生的课题研究。