乏氧微环境诱导的鼻咽癌乏氧相关基因表达的研究及应用

乏氧是肿瘤对放化疗抗拒和患者预后不良的重要因素。鼻咽癌在我国南方地区高发，临床观察鼻咽癌乏氧现象极为常见。目前对鼻咽癌乏氧及乏氧对鼻咽癌基因表达影响的研究很少，有必要对鼻咽癌乏氧进行深入系统的研究。我们已初步建立了可经乏氧调控生物标志融合基因（HSV1-TK/GFP）表达的人鼻咽癌乏氧研究模型。拟利用PET、分子病理等技术对鼻咽癌乏氧进行内外源性乏氧标志物的分子影像研究，评价内源性乏氧标志物HSV1-TK/GFP并揭示鼻咽癌乏氧的分布规律；根据乏氧诱导GFP表达程度，利用流式细胞分离技术、cDNA微阵列和实时RT-PCR，研究鼻咽癌乏氧基因表达谱，确定与鼻咽癌乏氧调控机制相关的基因及基因网络；检测鼻咽癌临床标本中乏氧调控相关基因的表达水平，并探讨其与临床预后的相互关系以及作为潜在靶分子的可能性。本项目的完成有望为今后开展鼻咽癌个体化治疗，即乏氧影像引导下的精准放疗和靶向治疗提供科学依据。

乏氧是肿瘤恶性表型增加、对放化疗抗拒和患者预后不良的重要因素，且临床观察鼻咽癌乏氧现象极为常见。目前世界上对鼻咽癌乏氧微环境变化与鼻咽癌乏氧相关基因表达影响和鼻咽癌乏氧分子影像的研究很少，有必要对鼻咽癌乏氧进行深入系统的研究。.我们基本上按照原计划进行了该项研究，对源于广东地区鼻咽癌患者的细胞株SUNE1采用基因重组技术，成功地建立了利用乏氧调控生物标志基因HRE-tkeGFP表达的鼻咽癌乏氧研究的细胞和动物模型（SUNE1/HRE-tkeGFP），研究鼻咽癌乏氧对HRE-tkeGFP、HIF1下游调控基因及EB病毒LMP1等基因表达的影响；检测该融合基因tkeGFP和EB病毒基因在肿瘤内的表达，并与内源性、外源性乏氧标志物进行空间分布的比较。根据乏氧诱导GFP表达程度分离出不同程度的乏氧细胞，采用cDNA微阵列研究鼻咽癌肿瘤在不同乏氧状态下的乏氧基因表达谱，确定与鼻咽癌乏氧调控机制相关基因及其调控基因。.我们研究显示18F-FDG PET/CT在恶性肿瘤的诊断、放疗靶区确定、疗效监测及预后预测方面有着一定的价值。本研究结果显示，基于18F-FDG PET/CT图像应用梯度法勾画鼻咽癌靶区，能在不同程度上改变病例靶区体积。与基于CT图像进行的肿瘤靶区勾画，全组病例鼻咽原发肿瘤体积平均缩小25.85%，78.3%的病例鼻咽原发肿瘤体积发生明显改变。转移淋巴结靶体积平均增大34.59%。总肿瘤体积平均缩小17.05%，50.6%的病例总靶体积发生明显改变。18F-FDG PET/CT相关参数最大标准摄取值（SUVmax）、肿瘤代谢体积（MTV）、糖酵解指数（TLG）是影响鼻咽癌患者预后的因素。.我们将上述研究结果总结整理，目前已发表SCI论文3篇，国际期刊论文3篇，国内核心期刊论文3篇，综述2篇；更多的论文在撰写中。参加国内外学术交流5次。我们已经基本完成了预期的研究目标，申请结题。