从成纤维样滑膜细胞探讨HMGB1在类风湿关节炎关节破坏中的作用及其机制

高迁移率族蛋白-1（HMGB1）是新近研究发现的一种重要的炎性细胞因子，本课题组前期研究发现HMGB1可能与类风湿关节炎（RA）关节破坏密切相关，但HMGB1导致关节破坏的机制未明，是否通过成纤维样滑膜细胞（FLS），目前尚未见报道。本项目以Ⅱ型胶原诱导的小鼠关节炎为模型，通过关节腔注射重组HMGB1腺病毒载体促使关节内HMGB1局部高表达，观察HMGB1在小鼠关节炎关节破坏中的作用，重点观察其对FLS增殖和关节破坏关键蛋白MMPs、cathepsins-K、RANKL、DKK-1表达的影响；进一步从RA患者滑膜中分离FLS，以HMGB1刺激，观察其对FLS增殖、侵蚀迁移能力、炎症因子及关节破坏相关蛋白表达的影响，以揭示HMGB1通过FLS导致关节破坏的细胞分子机制。开展本项目研究，可望从FLS角度阐明HMGB1在RA中的导致关节破坏的作用及机制，并为RA防治提供某些新思路和实验线索。

高迁移率族蛋白-1（HMGB1）是新近研究发现的一种重要的炎性细胞因子，但 HMGB1在类风湿关节炎关节破坏中的机制未明，是否通过成纤维样滑膜细胞（FLS）发挥作用，目前尚未见报道。本研究通过动物实验和细胞实验观察了HMGB1在类风湿关节炎骨质破坏中的作用及机制。结果发现：（1） HMGB1在佐剂性关节炎大鼠软骨和骨质破坏区表达明显增强，这提示HMGB1不仅参与炎症过程，也参与了软骨和骨质破坏的病理过程，（2）不同浓度HMGB1单独刺激FLS体外增殖差异无影响，IL-1β、HMGB1/IL-1β复合物、LPS、HMGB1/LPS复合物组也同样对FLS增殖无影响，（3）小剂量HMGB1不能刺激FLS分泌炎症因子，大剂量(2000ng/ml)可显著刺激FLS分泌炎症因子；小剂量 IL-1β和LPS不能促进FLS分泌炎症因子， 但HMGB1/IL-1β复合物、HMGB1/LPS复合物共刺激可促进FLS炎症因子的分泌，且呈剂量依赖性，（4）不同浓度的HMGB1、IL-1β和LPS不能刺激FLS分泌基质金属蛋白酶；但HMGB1/IL-1β复合物、HMGB1/LPS复合物共刺激可促进FLS基质金属蛋白酶的分泌，且呈剂量依赖性。 HMGB1主要协同他炎症因子促进FLS分泌炎症因子和产生基质金属蛋白酶等多个环节参与类风湿关节炎的骨质破坏。