组蛋白去乙酰化酶抑制剂（HDACi）对子宫腺肌病中孕激素受体-B基因表达调控机制的研究

子宫腺肌病（ADM）的发病趋于年轻化，多数患者要求药物治疗保留生育功能。但由于发病机制不清，临床治疗疗效欠佳。在前期研究中我们发现1）ADM异位细胞PR-B表达下降而NF-κB表达升高。2）HDACi不仅能抑制ADM异位细胞生长，上调PR-B表达，还能有效缓解患者的疼痛症状。故我们提出NF-κB/PR-B调节失衡可能是导致ADM产生/维持的假设，并推测HDACi可打破此通路发挥治疗作用。.本课题拟1）通过体外实验观察HDACi处理ADM异位细胞前后，PR-B基因表达、DNA甲基化和组蛋白乙酰化状态的变化，以及HDACi对NF-κB通路的影响，从而来解析HDACi是通过何种途径打破NF-κB/PR-B的失平衡，调控PR-B基因表达，最终达到治疗ADM的目的。2）通过小鼠模型，体内评价HDACi的治疗作用。以期为ADM发病机制的研究提供新思路，并为研究基于表观遗传改变的药物作用靶点奠定基础。

子宫腺肌病（ADM）的发病机制不清，药物临床治疗疗效欠佳。在本研究中：1）我们用免疫组化的方法发现子宫腺肌病患者组织标本中组蛋白去乙酰化酶（HDACs）表达升高，并且HDAC2与患者的痛经程度相关。提示组蛋白去乙酰化酶抑制剂（HDACi）可能用于治疗子宫腺肌病。另外我们还找出了3个痛经相关的生物学标记物(组织因子TF以及血管生成相关因子SLIT2和ROBO1) ，为子宫腺肌病的靶向治疗提供依据。2)用甲基化特异性PCR（MSP）方法检测PR-B甲基化状态的变化；用Realtime PCR和Western Blot方法比较处理前后PR-B mRNA和蛋白表达的改变。实验结果显示，ADM异位内膜基质细胞PR-BmRNA及蛋白表达明显低于正常内膜基质细胞，而PR-B甲基化程度却显著高于正常内膜基质细胞。经过HDACi--曲古霉素（TSA）和去甲基化药物（5-aza-2-deoxycytidine，ADC）处理以后，异位内膜基质细胞PR-B甲基化明显降低，与之相对应的是，PR-BmRNA及蛋白表达明显增高，并且TSA和ADC对PR-B的作用有协同作用。由此可看出，ADM异位内膜基质细胞中，PR-B表达下调可能与ADM的发生发展相关，并与PR-B的异常甲基化密切关联。3）本课题组已将子宫腺肌病小鼠模型造模成功，并且发现ADM小鼠痛域低于正常对照小鼠。 并且HDACi可以减少子宫收缩，提高腺肌病小鼠的痛域，上调异位病灶中PR基因表达，下调NF－κB，COX-2和OTR基因的表达。本课题的研究结果为ADM发病机制的研究提供了新思路，并为开发新的、基于表观遗传改变的治疗ADM药物靶点提供了理论依据及实验基础。