胞质铁蛋白对炎症介质产生和释放的影响及其分子机制的研究

细胞胞质铁蛋白（CFt）是细胞内贮存铁的重要蛋白。研究发现炎症介质能够诱导CFt的表达增加，但在炎症发生时，CFt表达对炎症介质产生和释放的影响及其分子机制并不清楚，还未见报道。本项目以小鼠腹腔巨噬细胞Raw264.7为主要研究对象，利用分子克隆技术和RNA干扰技术构建CFt的稳定过表达和低表达细胞系，以内毒素LPS为炎症诱导剂，利用Real-time PCR、Western-blot、流式细胞术分析和EMSA、ELASA等方法，探讨CFt表达对肿瘤坏死因子（TNF-α）、白介素1-β（IL-1β）及炎症介质一氧化氮（NO）、前列腺素E2（PGE2）的产生和释放的影响及其分子机制，揭示CFt的表达在炎症发生过程中的关键调节作用，为探索建立基于调节CFt表达而进行抗炎治疗的新途径提供理论依据。

细胞胞质铁蛋白是细胞内贮存铁的重要蛋白。它能够通过储存铁降低细胞内的FENTON反应，从而降低氧化应激水平，因而被认为是一种抗氧化剂。研究发现炎症介质能够诱导铁蛋白的表达增加，但在炎症发生时，铁蛋白表达对炎症介质产生和释放的影响及其分子机制还未见报道。在本项目的研究中发现，LPS能够诱导小鼠腹腔巨噬细胞Raw264.7内FTL的表达。为了研究FTL在LPS激活的巨噬细胞中的作用，我们利用分子克隆技术和RNA干扰技术构建了铁蛋白轻链（FTL）的稳定高表达和低表达细胞系。结果显示，过表达FTL显著抑制了LPS诱导的巨噬细胞内肿瘤坏死因子（TNF-α）、白介素1-β（IL-1β）及炎症介质一氧化氮（NO）、前列腺素E2（PGE2）的产生和释放。此外，LPS能够抑制LPS诱导的炎症信号转导通路MAPKs和NF-κB的激活。干扰FTL的表达对LPS激活的巨噬细胞内的炎症应激呈现与过表达FTL相反的结果。这些研究结果表明铁蛋白的表达在LPS激活的巨噬细胞及其炎症发生过程中的具有关键调节作用，这些结果也揭示了FTL也许可以作为潜在的治疗炎症疾病的靶点，为探索建立基于调节铁蛋白表达而进行抗炎治疗的新途径提供理论依据。