DC-SIGN/TLR4串话调控NLRP3与胃上皮细胞转分化后DC样细胞功能研究

The pathogenic mechanism of Helicobacter pylori (Hp) infection is unclear. Our study demonstrated that gastric epithelial cells infected by Hp could express dendritic cell (DC) phenotype molecule DC-SIGN, which was involved in the inflammation of gastric mucosa. Further studies showed that after Hp infection, the expression of NLRP3 in gastric epithelial cells may be upregulated through DC-SIGN/TLR4 crosstalk and thus affect the secretion of proinflammatory cytokines (IL-1β and IL-18). Based on the gastric epithelial-immune cell trans-differentiation, the current study will explore the relationship between DC-SIGN and TLR4, as well as, the role of DC-SIGN/TLR4 crosstalk in NLRP3 expression and the DC like function of gastric epithelial cell. Finally, it may elucidate the diversity role of gastric epithelial cell and provide a novel therapeutic strategy in Hp infectious gastritis.

幽门螺杆菌（H.pylori）感染致病机制仍不甚清楚。近年固有免疫中模式识别受体（PRR）间串话调控及其与H.pylori致病关系受到关注。我们前期发现H.pylori感染下胃上皮细胞可通过转分化形式表达树突状细胞（DC）表型分子DC-SIGN，参与胃黏膜炎症启动。继而发现和推测，胃上皮细胞DC样促炎作用，可能与DC-SIGN发生并通过与TLR4信号串话，调控炎症小体NLRP3促进炎症因子IL-1β、IL-18分泌有关，提示可能是致H.pylori胃黏膜损伤的关键因素。根据上述现象，本项目以胃上皮细胞DC样功能及PRR分子调控为切入点，拟通过观察DC-SIGN与TLR4关系，DC-SIGN/TLR4串话对NLRP3表达调控，以及对胃上皮细胞针对H.pylori免疫应答调节的影响，以期探讨胃上皮细胞DC样功能的可能机制，为进一步阐释H.pylori感染致病机制以及临床早期干预提供新策略。

H.pylori是人类常见的模式致病菌和病原菌之一，在其与胃粘膜上皮细胞接触及定植后，可通过一系列复杂生物学过程导致胃黏膜损伤和溃疡形成，甚至是癌前病变。在这一过程中，炎症免疫反应是H.pylori黏膜损伤的重要病理生理机制,然而目前具体的免疫调控机制尚不明确。本项目基于前期工作基础，从胃上皮细胞DC样功能及其免疫调控角度，并且以模式识别受体（PRR）分子调控及DC-SIGN/TLR4之间串话为切入点，进一步观察DC-SIGN/TLR4协调关系与炎症小体NLRP3表达调控的关系，从而进一步了解H.pylori感染后胃上皮细胞免疫应答。我们研究发现，慢性胃炎患者的胃黏膜上皮细胞在H.pylori感染下表达DC-SIGN，且与H.pylori感染下胃黏膜炎症病变程度密切相关，通过细胞实验发现，LPS刺激胃上皮细胞表达DC样标志物，因此我们推测胃上皮细胞在H.pylori感染后发挥DC样功能参与H.pylori感染胃黏膜局部炎症和免疫损伤。离体及体外实验进一步发现，DC-SIGN与TLR4共定位于H.pylori或LPS刺激的胃上皮细胞，并且两者可发生相互作用。DC-SIGN可以通过非Myd88依赖途径激活NLRP3炎症小体从而促进IL-1β和IL-18的分泌，在干扰DC-SIGN或TLR4可以降低NLRP3的表达，并且同时抑制IL-1β和IL-18的表达。以上结果表明，DC-SIGN与TLR4的相互作用在NLRP3的激活中发挥着重要作用，并参与针对H.pylori感染的特异性免疫反应的启动。鉴于IL-1β促进Th17免疫反应而参与胃黏膜免疫病理，而IL-18是Treg分化成熟的必要条件，从而我们推测，DC-SIGN/TLR4之间的串话可能参与调控Th17/Treg的平衡，从而调节细胞免疫应答，该影响的具体机制需要进一步的深入研究。本研究将为进一步阐释H.pylori感染及致病免疫调控机制，并为其治疗提供新的理论依据、干预措施及作用靶点。